人軟骨關聯(lián)蛋白(CRTAP)ELISA檢測試劑盒?ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等，子科生物ELISA產品主要用雙抗體夾心法。
?標本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
?產品性能：靈敏度高，特異性強，重復性。
?產品包裝：盒（KIT）（含試劑+酶聯(lián)板+覆膜等）

人軟骨關聯(lián)蛋白(CRTAP)ELISA檢測試劑盒樣本的采集及保存

一般的生物標本包括有：

血液、體液、內臟器官、糞便、胃液、活檢組織、組織提取液、天然孔分泌物及各種表達系統(tǒng)的表達產物等，一般為無菌操作，低溫保存(-80℃、液氮)

一．如果采集的實質器官則要求：

1、 器官實質不能太小

2、 以采集實質性病灶區(qū)為佳：如淋巴結、心臟、非、肺、脾以及腸管等病毒、病菌聚集的地方為佳

3、 同一病例裝入同一容器，并做好標記

4、 應在0-8℃的低溫儲存和運輸

5、 實質性器官的處理：

5.1、取實質性器官約0.5mg左右，充分剪碎或研磨

5.2、加入約500ul的/生鹽水，充分混勻

5.3、離心5000rmp x10min，去上清

5.4、-20℃保存，作為待檢標本(切勿反復凍融)

人軟骨關聯(lián)蛋白(CRTAP)ELISA檢測試劑盒

二．體液(常見的包括血清、血漿、唾液以及尿液等)的處理方式

1、血液包括血漿和血清，它們的主要區(qū)別就是：血清凝血而血漿不凝血，所以它們的處理方式也就不一樣

1.1、采集血漿時一般不加抗凝劑(主要為枸櫞酸鹽和檸檬酸鹽)，采集后立即離心800-1000rmp x 5min分離，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?/span>

1.2、如要采集血清，一般要加入總體積1%的抗凝劑，采集后先室溫或4℃靜置半小時后，800-1000rmp x 5min分離，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?/span>

2、胃液和唾液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用，但是一般飯后半小時內不易采集，因為剛進食的唾液中富含豐富的唾液淀粉酶，的采集的時間時空腹采集；

3、尿液的采集方式基本和唾液一樣的，即現(xiàn)采現(xiàn)用，但是一般隔夜尿不采集；

4、組織提取液如肺泡灌洗液等，采集后離心分離，800-1000rmp x 5min，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?/span>

三、糞便以及天然孔排泄物：采集后一般現(xiàn)用/生鹽水溶解，充分混勻，800-1000rmp x 5min分離，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?/span>

四、活檢組織一般進行穿刺檢測，zui常見的就是肝活檢，像病毒性肝炎、脂肪肝、各種類型的肝硬化等進行活檢簡單方便、準確。

五、表達產物的檢測

(一)真核表達產物

1、 細胞上清(分泌性蛋白)

1.2、貼壁細胞或半貼壁，直接將細胞培養(yǎng)上清吸出，10000rmp x10min， 取上清，-20℃或4℃保存，作為標本進行檢測，如有需要可進行透析或純化處理；

1.2、不貼壁細胞，將培養(yǎng)基和細胞轉移至10ml離心管，500-800rmp x10min，吸取上清至另一10ml離心管中，10000rmp x10min， -20℃或4℃保存，作為標本進行檢測，如有需要可進行透析或純化處理；

2、 細胞裂解物(非分泌性蛋白)

2.1、貼壁細胞或半貼壁，直接將細胞培養(yǎng)上清吸出，然后用001M (pH 7.4)將細胞吹下至10ml離心管，500-800rmp x10min，棄上清，沉淀轉移至1.5ml離心管中， DDW重懸，置冰水浴中用超聲波裂解儀進行裂解，10000rmp x10min，取上清，-20℃或4℃保存，作為標本進行檢測，如有需要可進行透析或純化處理；

2.2、不貼壁細胞，將培養(yǎng)基和細胞轉移至10ml離心管，500-800rmp x10min，棄上清，沉淀移至另一10ml離心管中，0.01M (pH 7.4)重懸，500-800rmp x10min，棄上清，沉淀移至1.5ml離心管中， DDW重懸，置冰水浴中用超聲波裂解儀進行裂解，10000rmp x10min，取上清， -20℃或4℃保存，作為標本進行檢測，如有需要可進行透析或純化處理；

(二)原核(大腸桿菌表達系統(tǒng))表達產物

1、表達上清(非融合性蛋白)

直接將培養(yǎng)物和上清吸出，10000rmp x10min， 取上清，-20℃或4℃保存，作為標本進行檢測，如有需要可進行透析或純化處理；

2、菌體裂解物(融合性蛋白)

直接將培養(yǎng)物和上清吸出，10000rmp x10min，棄上清，沉淀用洗一遍，500-800rmp x10min，棄上清，DDW重懸沉淀，冰水浴中用超聲波裂解儀進行裂解，10000rmp x10min，取上清，-20℃或4℃保存，作為標本進行檢測，如有需要可進行透析或純化處理；

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