人抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)ELISA檢測(cè)試劑盒●品牌：子科生物ZIKER,美國(guó)R&D,美國(guó)immonoway,美國(guó)sciencell,德國(guó)IBL
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自備物品
1.酶標(biāo)儀(盡量提前預(yù)熱)
2.微量加液器、吸頭
3.蒸餾水或去離子水以及濾紙

人抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)ELISA檢測(cè)試劑盒樣本的采集及保存
一般的生物標(biāo)本包括有：
血液、體液、內(nèi)臟器官、糞便、胃液、活檢組織、組織提取液、天然孔分泌物及各種表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)產(chǎn)物等，一般為無(wú)菌操作，低溫保存(-80℃、液氮)
一．如果采集的實(shí)質(zhì)器官則要求：
1、 器官實(shí)質(zhì)不能太小
2、 以采集實(shí)質(zhì)性病灶區(qū)為佳：如淋巴結(jié)、心臟、非、肺、脾以及腸管等病毒、病菌聚集的地方為佳
3、 同一病例裝入同一容器，并做好標(biāo)記
4、 應(yīng)在0-8℃的低溫儲(chǔ)存和運(yùn)輸
5、 實(shí)質(zhì)性器官的處理：
5.1、取實(shí)質(zhì)性器官約0.5mg左右，充分剪碎或研磨
5.2、加入約500ul的/生鹽水，充分混勻
5.3、離心5000rmp x10min，去上清
5.4、-20℃保存，作為待檢標(biāo)本(切勿反復(fù)凍融)
二．體液(常見(jiàn)的包括血清、血漿、唾液以及尿液等)的處理方式
1、血液包括血漿和血清，它們的主要區(qū)別就是：血清凝血而血漿不凝血，所以它們的處理方式也就不一樣
1.1、采集血漿時(shí)一般不加抗凝劑(主要為枸櫞酸鹽和檸檬酸鹽)，采集后立即離心800-1000rmp x 5min分離，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br />1.2、如要采集血清，一般要加入總體積1%的抗凝劑，采集后先室溫或4℃靜置半小時(shí)后，800-1000rmp x 5min分離，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br />2、胃液和唾液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用，但是一般飯后半小時(shí)內(nèi)不易采集，因?yàn)閯傔M(jìn)食的唾液中富含豐富的唾液淀粉酶，的采集的時(shí)間時(shí)空腹采集；
3、尿液的采集方式基本和唾液一樣的，即現(xiàn)采現(xiàn)用，但是一般隔夜尿不采集；
4、組織提取液如肺泡灌洗液等，采集后離心分離，800-1000rmp x 5min，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br />三、糞便以及天然孔排泄物：采集后一般現(xiàn)用/生鹽水溶解，充分混勻，800-1000rmp x 5min分離，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br />四、活檢組織一般進(jìn)行穿刺檢測(cè)，zui常見(jiàn)的就是肝活檢，像病毒性肝炎、脂肪肝、各種類型的肝硬化等進(jìn)行活檢簡(jiǎn)單方便、準(zhǔn)確。
五、表達(dá)產(chǎn)物的檢測(cè)
(一)真核表達(dá)產(chǎn)物
1、 細(xì)胞上清(分泌性蛋白)
1.2、貼壁細(xì)胞或半貼壁，直接將細(xì)胞培養(yǎng)上清吸出，10000rmp x10min， 取上清，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；
1.2、不貼壁細(xì)胞，將培養(yǎng)基和細(xì)胞轉(zhuǎn)移至10ml離心管，500-800rmp x10min，吸取上清至另一10ml離心管中，10000rmp x10min， -20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；
2、 細(xì)胞裂解物(非分泌性蛋白)
2.1、貼壁細(xì)胞或半貼壁，直接將細(xì)胞培養(yǎng)上清吸出，然后用001M (pH 7.4)將細(xì)胞吹下至10ml離心管，500-800rmp x10min，棄上清，沉淀轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管中， DDW重懸，置冰水浴中用超聲波裂解儀進(jìn)行裂解，10000rmp x10min，取上清，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；
2.2、不貼壁細(xì)胞，將培養(yǎng)基和細(xì)胞轉(zhuǎn)移至10ml離心管，500-800rmp x10min，棄上清，沉淀移至另一10ml離心管中，0.01M (pH 7.4)重懸，500-800rmp x10min，棄上清，沉淀移至1.5ml離心管中， DDW重懸，置冰水浴中用超聲波裂解儀進(jìn)行裂解，10000rmp x10min，取上清， -20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；
(二)原核(大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng))表達(dá)產(chǎn)物
1、表達(dá)上清(非融合性蛋白)
直接將培養(yǎng)物和上清吸出，10000rmp x10min， 取上清，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；
2、菌體裂解物(融合性蛋白)
直接將培養(yǎng)物和上清吸出，10000rmp x10min，棄上清，沉淀用洗一遍，500-800rmp x10min，棄上清，DDW重懸沉淀，冰水浴中用超聲波裂解儀進(jìn)行裂解，10000rmp x10min，取上清，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；

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