人神經(jīng)調(diào)節(jié)素2(NRG2)ELISA試劑盒試劑盒性能
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。
2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和15%;
需自備試劑和器材:
1. 標準規(guī)格酶標儀。
2. 自動洗板機。
3. 37℃恒溫箱。
4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS 配法為:1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。
0.01 M PBS(pH7.2-7.6) 配法:1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽,應(yīng)加上分子式中水的含量。
9. 蒸餾水
10. 吸水紙
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注意事項
1.試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2.加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔之見的時間間隔過大,否則將會導致不同的預(yù)孵育時間,從而影響實驗的準確性以及重復(fù)性;一般加樣時間控制在10分鐘內(nèi),如果樣本數(shù)量過多,可使用多道移液器。
3.孵育:樣品要在密閉的容器內(nèi)進行孵育,嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4.洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,同時要消除板底殘留的液體和手指痕跡,避免影響zui后的酶標儀讀數(shù)。
5.反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,10分鐘左右),如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
6.建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
7.建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商,如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人神經(jīng)調(diào)節(jié)素2(NRG2)ELISA試劑盒操作步驟
1. 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實驗過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進行。
2. 取出酶標板,按照標準品的次序分別加入50μl的標準品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的樣品,空白對照加入50μl的蒸餾水;
4. 在樣品孔中加入10μl的生物素;(不含空白對照孔,切忌:生物素只加樣品孔!)
5. 在各孔中加入100μl的酶標記溶液;(不含空白對照孔)
6. 將酶標板用封口膠密封后,37℃孵育反應(yīng) 1小時;(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7. 充分清洗酶標板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋)
8. 酶標板洗滌后用吸水紙*拍干;
9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對照孔)
10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘;
11.各孔加入50μl終止液,終止反應(yīng);
結(jié)果判斷:
1. 30分鐘內(nèi)在波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;
2. 以O(shè)D值為縱坐標,以標準品的濃度為橫坐標,繪制曲線圖;
3. 根據(jù)樣品的OD值查找對應(yīng)的濃度范圍;
人神經(jīng)調(diào)節(jié)素2(NRG2)ELISA試劑盒羊抗人IgA(α鏈特異) 0.1ml 子科ZIKER
羊抗人IgM(μ鏈特異) 0.1ml 子科ZIKER
羊抗人C3 0.1ml 子科ZIKER
羊抗人纖維蛋白原 0.1ml 子科ZIKER
羊抗人白蛋白 0.1ml 子科ZIKER
羊抗人IgG、A、M 0.1ml 子科ZIKER
兔抗人IgG-F(ab)2 0.1ml 子科ZIKER
兔抗猴IgG 0.1ml 子科ZIKER
兔抗豚鼠IgG 0.1ml 子科ZIKER
兔抗狗IgG 0.1ml 子科ZIKER
羊抗人IgG(1:500-2000) 0.1ml 子科ZIKER
羊抗人IgG(1:500-2000) 0.5ml 子科ZIKER
羊抗人IgG(1:500-2000) 1ml 子科ZIKER
羊抗兔IgG(1:500-2000) 0.1ml 子科ZIKER
羊抗兔IgG(1:500-2000) 0.5ml 子科ZIKER
羊抗兔IgG(1:500-2000) 1ml 子科ZIKER
羊抗小鼠IgG(1:500-2000) 0.1ml 子科ZIKER
羊抗小鼠IgG(1:500-2000) 0.5ml 子科ZIKER
羊抗小鼠IgG(1:500-2000) 1ml 子科ZIKER
羊抗大鼠IgG(1:500-2000) 0.1ml 子科ZIKER
羊抗大鼠IgG(1:500-2000) 0.5ml 子科ZIKER
羊抗豬IgG(1:500-2000) 0.1ml 子科ZIKER
羊抗豬IgG(1:500-2000) 0.5ml 子科ZIKER
羊抗牛IgG 0.1ml 子科ZIKER
羊抗牛IgG 0.5ml 子科ZIKER
羊抗馬IgG 0.1ml 子科ZIKER
羊抗馬IgG 0.5ml 子科ZIKER
羊抗雞IgG 0.1ml 子科ZIKER
羊抗雞IgG 0.5ml 子科ZIKER
兔抗牛IgG 0.1ml 子科ZIKER
兔抗牛IgG 0.5ml 子科ZIKER
兔抗雞IgG 0.1ml 子科ZIKER
兔抗雞IgG 0.5ml 子科ZIKER
兔抗馬IgG 0.1ml 子科ZIKER
兔抗馬IgG 0.5ml 子科ZIKER
兔抗羊IgG 0.1ml 子科ZIKER
兔抗羊IgG 0.5ml 子科ZIKER
兔抗羊IgG 1ml 子科ZIKER
兔抗HRP-HRP(PVP) 0.1ml(1:1000) 子科ZIKER
兔抗HRP-HRP(PVP) 0.5ml(1:1000) 子科ZIKER
BSA-HRP 0.1ml(1:1000) 子科ZIKER
BSA-HRP 0.5ml(1:1000) 子科ZIKER
人白蛋白-HRP 0.1ml(1:1000) 子科ZIKER
人白蛋白-HRP 0.5ml(1:1000) 子科ZIKER
兔抗生物素-HRP 0.1ml 子科ZIKER
兔抗生物素-HRP 0.5ml 子科ZIKER
兔抗親和素-HRP 0.1ml 子科ZIKER
兔抗親和素-HRP 0.5ml 子科ZIKER
兔抗Dig-HRP 0.1ml 子科ZIKER
兔抗Dig-HRP 0.5ml 子科ZIKER
兔抗FITC-HRP 0.1ml 子科ZIKER
兔抗FITC-HRP 0.5ml 子科ZIKER