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人胸腺因子(TF)ELISA試劑盒

時間:2017-7-20閱讀:199
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ELISA試劑盒需自備的設備及試劑:
1. 450±10nm濾光片的酶標儀(建議儀器使用前提前預熱);
2. 單道或多道微量加液器及吸頭;
3. 稀釋樣品的EP管;
4. 蒸餾水或去離子水;
5. 吸水紙;
6. 盛放洗液的容器。

人胸腺因子(TF)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
5. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
6. 溫育:操作同3。
7. 洗滌:操作同5。
8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
9.  終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
10. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

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