牛白介素10(IL10) ELISA試劑盒標(biāo)本要求： 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

自備物品
1.酶標(biāo)儀(盡量提前預(yù)熱)
2.微量加液器、吸頭
3.蒸餾水或去離子水以及濾紙；

牛白介素10(IL10) ELISA試劑盒實驗操作注意事項
1.試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2．加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔之見的時間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間，從而影響實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性；一般加樣時間控制在10分鐘內(nèi)，如果樣本數(shù)量過多，可使用多道移液器。
3.孵育：樣品要在密閉的容器內(nèi)進(jìn)行孵育，嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。
4.洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，同時要消除板底殘留的液體和手指痕跡，避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，10分鐘左右)，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
6.建議實驗前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
7.建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個標(biāo)本)，如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商，如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。

操作步驟
1. 取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實驗過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2. 取出酶標(biāo)板，按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的樣品，空白對照加入50μl的蒸餾水；
4. 在樣品孔中加入10μl的生物素；(不含空白對照孔,切忌：生物素只加樣品孔！)
5. 在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液；(不含空白對照孔)
6. 將酶標(biāo)板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng) 1小時；(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7. 充分清洗酶標(biāo)板3-5次，保持各孔有充足的水壓；(濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋)
8. 酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干；
9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl；(不含空白對照孔)
10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；
11.各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；

結(jié)果判斷
1. 30分鐘內(nèi)在波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值；
2. 以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，繪制曲線圖；
3. 根據(jù)樣品的OD值查找對應(yīng)的濃度范圍；

牛白介素10(IL10) ELISA試劑盒庖肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
梭菌增菌培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
庖肉牛肉粒     BR 100g    瓶
卵黃瓊脂基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
MC培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
MRS肉湯     BR 250g    瓶
MRS培養(yǎng)基(莫匹羅星鋰鹽改良MRS培養(yǎng)基基礎(chǔ))     BR 250g    瓶
BBL瓊脂培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
PYG液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
TPY液體培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
Bolton肉湯基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
改良CCD瓊脂基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
Skirrow瓊脂     BR 250g    瓶
布氏肉湯     BR 250g    瓶
胰月示－亞硫酸鹽－環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC)     BR 100g    瓶
0.1%蛋白胨水     BR 250g    瓶
液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FT)     BR 250g    瓶
亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ)(SPS)     BR 250g    瓶
0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(藥典)     BR 250g    瓶
含鐵牛奶培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
水解酪蛋白胨(MH)肉湯     BR 100g    瓶
水解酪蛋白胨(MH)瓊脂     BR 250g    瓶
葡萄糖肉湯     BR 250g    瓶
胰化大豆瓊脂     BR 250g    瓶
胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA)     BR 250g    瓶
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
改良EC肉湯(mEC+n)基礎(chǔ)     BR 250g    瓶