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牛甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒

時(shí)間:2017-5-8閱讀:274
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自備物品:
1.酶標(biāo)儀(盡量提前預(yù)熱)
2.微量加液器、吸頭
3.蒸餾水或去離子水以及濾紙;

牛甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒常見(jiàn)的包括血清、血漿、唾液以及尿液等的處理方式:
1、血液包括血漿和血清,它們的主要區(qū)別就是:血清凝血而血漿不凝血,所以它們的處理方式也就不一樣
1.1、采集血漿時(shí)一般不加抗凝劑(主要為枸櫞酸鹽和檸檬酸鹽),采集后立即離心800-1000rmp x 5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br />1.2、如要采集血清,一般要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室溫或4℃靜置半小時(shí)后,800-1000rmp x 5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br />2、胃液和唾液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用,但是一般飯后半小時(shí)內(nèi)不易采集,因?yàn)閯傔M(jìn)食的唾液中富含豐富的唾液淀粉酶,的采集的時(shí)間時(shí)空腹采集;
3、尿液的采集方式基本和唾液一樣的,即現(xiàn)采現(xiàn)用,但是一般隔夜尿不采集;
4、組織提取液如肺泡灌洗液等,采集后離心分離,800-1000rmp x 5min,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?/p>

牛甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)
1.試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存。實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2.加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔之見(jiàn)的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性;一般加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi),如果樣本數(shù)量過(guò)多,可使用多道移液器。
3.孵育:樣品要在密閉的容器內(nèi)進(jìn)行孵育,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4.洗滌:洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指痕跡,避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,10分鐘左右),如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
6.建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
7.建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),可和所購(gòu)經(jīng)銷商,如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。

操作步驟
1. 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2. 取出酶標(biāo)板,按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的樣品,空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水;
4. 在樣品孔中加入10μl的生物素;(不含空白對(duì)照孔,切忌:生物素只加樣品孔!)
5. 在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液;(不含空白對(duì)照孔)
6. 將酶標(biāo)板用封口膠密封后,37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí);(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7. 充分清洗酶標(biāo)板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋)
8. 酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干;
9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對(duì)照孔)
10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘;
11.各孔加入50μl終止液,終止反應(yīng);

ZIKER-1181R    Anti-ORX-A (orexin-A)  增食欲素-A/欲激素A    子科生物ZIKER
ZIKER-1110R    Anti-Osx (Osterix)  成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0807R    anti-Os05g/0477200 protein  抗水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-1314R    anti-OTR(oxytocin receptor)  縮宮素受體抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0283R    Anti-OVA  雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-1095R    Anti-OXR (Orexin receptor)  食欲素受體抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-1174R    Anti-P14ARF  抑癌基因p14抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0740R    Anti-P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A)  抑癌基因p16抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0534R    Anti-P19ARF  p19ARF抑癌基因抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0741R    Anti-P21/WAF1/CIP1  p21抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0742R    Anti-P27/kip1 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B)  P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑    子科生物ZIKER
ZIKER-1204R    Anti-P2Y1 receptor  P2Y1受體抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0427R    Anti-P311 protein  神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0637R    Anti-P38 MAPK(MAPK14 non-phospha)  絲裂原活化蛋白激酶p38抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0636R    Anti-P-p38 MAPK/MAPK14 (phospho-specific Thr180/Tyr182)  磷酸化-絲裂原活化蛋白激酶p38抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0033R    Anti-P53(wt-p53)  腫瘤抑制基因抗體(野生型P53)    子科生物ZIKER
ZIKER-0723R    Anti-P63 protein  P63 腫瘤抑制基因抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0197R    Anti-PACAP/VIP receptor  腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體-II/血管活性腸肽受體-II抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0198R    Anti-PACAP/VIP receptor-I  腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體-I/血管活性腸肽-I抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0190R    Anti-PACAP-27/38  腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0200R    Anti-PACAP-38  腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0318R    Anti-PADI4/PAD4(Protein-arginine deiminase type IV) Anti-PADI4/PAD4(Protein-arginine deiminase type IV)  關(guān)節(jié)炎相關(guān)基因抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-1119R    Anti-PAF (plaet-activating factor)  血小板活化因子抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0588R    anti-PALB2(partner and locaizer of BZIKERA2)  
ZIKER-0773R    Anti-PANDER/FAM3A  胰腺衍生因子抗體    子科生物ZIKER
ZIKER-0739R    Anti-PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c)  磷脂酸磷酸酶2C抗體    子科生物ZIKER

 

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