猴凋亡相關(guān)因子配體(FASL) ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。
標(biāo)本的采集及保存
1. 血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)了夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注：標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

猴凋亡相關(guān)因子配體(FASL) ELISA試劑盒操作步驟
1、 取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2、 取出酶標(biāo)板，按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3、空白微孔中加入50μl的樣品，空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水；
4、 在樣品孔中加入10μl的生物素；(不含空白對(duì)照孔,切忌：生物素只加樣品孔！)
5、在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液；(不含空白對(duì)照孔)
6、將酶標(biāo)板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí)；(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7、 充分清洗酶標(biāo)板3-5次，保持各孔有充足的水壓；(濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋)
8、酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干；
9、各孔加入顯色劑A、B液各50μl；(不含空白對(duì)照孔)
10、各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；10、20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；

結(jié)果判斷
1、30分鐘內(nèi)在波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值；
2、以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，繪制曲線圖；
3、根據(jù)樣品的OD值查找對(duì)應(yīng)的濃度范圍；

標(biāo)本要求： 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

猴凋亡相關(guān)因子配體(FASL) ELISA試劑盒FITC標(biāo)記山羊抗人IgG    0.1ml
國(guó)產(chǎn)辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗體    0.1ml
國(guó)產(chǎn)熒光素標(biāo)記抗體    0.5ml
國(guó)產(chǎn)酶標(biāo)記親合素及生物素化抗體    0.1ml
國(guó)產(chǎn)純化抗體IgG    1mg/10mg
國(guó)產(chǎn)免疫球蛋白抗原    10mg
國(guó)產(chǎn)免疫血清(Immnl Serum)    0.5ml
辣根酶標(biāo)記抗兔IgG    0.1ml
辣根酶標(biāo)記抗人IgG(H+L)    0.1ml
辣根酶標(biāo)記抗小鼠IgG（H+L)    0.1ml
辣根酶標(biāo)記抗山羊IgG(H+L)    0.1ml
辣根酶標(biāo)記抗大鼠IgG(H+L)    0.1ml
堿磷酶標(biāo)記抗兔IgG    0.1ml
堿磷酶標(biāo)記抗小鼠IgG    0.1ml
堿磷酶標(biāo)記抗山羊IgG    0.1ml
堿磷酶標(biāo)記抗人IgG    0.1ml
堿磷酶標(biāo)記抗大鼠IgG    0.1ml
AP堿磷酶標(biāo)記抗人IgM    0.1ml
HRP辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素    0.1ml
堿磷酶標(biāo)記鏈霉卵白素    0.1ml
FITC標(biāo)記抗人C3c補(bǔ)體    0.1ml
FITC標(biāo)記抗人C4c補(bǔ)體    0.1ml
FITC標(biāo)記抗人C1q補(bǔ)體    0.1ml
FITC標(biāo)記抗人纖維蛋白原    0.1ml
FITC標(biāo)記抗人IgA    0.1ml
FITC標(biāo)記抗人IgG    0.1ml
FITC標(biāo)記抗人IgM    0.1ml
FITC標(biāo)記抗兔IgG    0.1ml
FITC標(biāo)記抗小鼠IgG    0.1ml
TRITC標(biāo)記抗小鼠IgG    0.1ml
FITC標(biāo)記抗山羊IgG    0.1ml
FITC標(biāo)記抗大鼠IgG    0.1ml
TRITC標(biāo)記抗兔IgG    0.1ml
TRITC標(biāo)記抗山羊IgG    0.1ml
TRITC標(biāo)記抗大鼠IgG    0.1ml
生物素化抗兔IgG    0.1ml
生物素化抗小鼠IgG    0.1ml
生物素化抗人IgG    0.1ml
生物素化抗大鼠IgG    0.1ml
生物素化抗山羊IgG    0.1ml
生物素化抗小鼠IgM    0.1ml