小鼠腎臟腦蛋白(KIBRA)ELISA試劑盒試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
小鼠腎臟腦蛋白(KIBRA)ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)了夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
小鼠腎臟腦蛋白(KIBRA)ELISA試劑盒
磷酸鹽緩沖液(pH7.2)pH7.2PBS ブイヨンpH7.2 PBS Broth 250g/瓶
pH7.4 磷酸鹽緩沖液(PBS)pH7.4PBS ブイヨンpH7.4 PBS Broth 250g/瓶
pH7.2 磷酸鹽緩沖液pH7.2PBS ブイヨンpH7.2 PBS Broth 250g/瓶
無(wú)菌檢驗(yàn)用洗脫液 無(wú)菌検査用洗脫液Eluent for the Sterile Test 250g/瓶
胰蛋白胨生理鹽水溶液(TPS)ペプトン食塩水溶液Tryptone Physiology Solution 250g/瓶
pH7.0 緩沖氯化鈉蛋白胨溶液pH7.0 緩衝食塩ペプトン溶液Buffered Sodium Chloride peptone Solution pH 7.0 250g/瓶
氯化鈉胰蛋白胨稀釋液トリプト食塩希釈液Sodium Chloride Tryptone Diluent 250g/瓶
蛋白胨-鹽溶液 ペプトンー塩溶液Peptone-Salt Solution 250g/瓶
酪胨-大豆卵磷脂-吐溫 20 液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)TAT 培地基礎(chǔ)Fluid Casein Digest-Soy Lecithin-PolysorZIKERte 20Medium ZIKERse 250g/瓶
0.1%蛋白胨水培養(yǎng)基 250g/瓶