污水處理設(shè)備 污泥處理設(shè)備 水處理過(guò)濾器 軟化水設(shè)備/除鹽設(shè)備 純凈水設(shè)備 消毒設(shè)備|加藥設(shè)備 供水/儲(chǔ)水/集水/排水/輔助 水處理膜 過(guò)濾器濾芯 水處理濾料 水處理劑 水處理填料 其它水處理設(shè)備
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經(jīng)營(yíng)模式:經(jīng)銷(xiāo)商
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所在地區(qū):江蘇南京市
聯(lián)系人:任女士 (銷(xiāo)售)
閱讀:209發(fā)布時(shí)間:2016-8-11
??藸?/span>細(xì)胞免疫熒光步驟
南京??藸柹锟萍加邢薰?,專(zhuān)業(yè)技術(shù)指導(dǎo),專(zhuān)業(yè)實(shí)驗(yàn)室,歡迎前來(lái)咨詢(xún)
免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescence technique )又稱(chēng)熒光抗體技術(shù),是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展zui早的一種。它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù)。很早以來(lái)就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合,利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。 *天:
1. 在培養(yǎng)板中將已爬好細(xì)胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;
2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min;
3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室溫通透20min(細(xì)胞膜上表達(dá)的抗原省略此步驟);
4. PBS浸洗玻片3次,每次3 min,吸水紙吸干PBS,在玻片上滴加正常山羊血清,室溫封閉30min;
5. 吸水紙吸掉封閉液,不洗,每張玻片滴加足夠量的稀釋好的一抗并放入濕盒,4℃孵育過(guò)夜;
第二天:
6. 加熒光二抗: PBST 浸洗爬片3次,每次3min,吸水紙吸干爬片上多余液體后滴加稀釋好的熒光二抗,濕盒中20-37℃孵育1h,PBST浸洗切片3次,每次3min;注意:從加熒光二抗起,后面所有操作步驟都盡量在較暗處進(jìn)行。
7. 復(fù)染核:滴加DAPI避光孵育5min,對(duì)標(biāo)本進(jìn)行染核,PBST 5min×4次洗去多余的DAPI;8. 用吸水紙吸干爬片上的液體,用含抗熒光淬滅劑的封片液封片,然后在熒光顯微鏡下觀察采集圖像。
8.有疑問(wèn)咨詢(xún)我們技術(shù)人員
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