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接種、分離、培養(yǎng)是微生物檢驗(yàn)工作中應(yīng)用zui多的基本操作技術(shù)。
1、接種技術(shù)
接種方法有多種,根據(jù)接種的菌株不同所使用的培養(yǎng)基也不同,接種時(shí)經(jīng)常使用接種環(huán)、接種針、無(wú)菌吸管或*等。
⑴接種方法
斜面培養(yǎng)基接種法
適用于純培養(yǎng)、擴(kuò)大培養(yǎng)及短時(shí)間保存菌種。
2、分離技術(shù)使用平板培養(yǎng)基進(jìn)行分離達(dá)到分離出單個(gè)菌落的目的,以供微生物的鑒別、純菌的保留,分離的方法有多種,常用的方法如下:
⑴劃線分離法
⑵傾注分離法
⑶涂布分離法
3、培養(yǎng)方法細(xì)菌培養(yǎng),要掌握溫度、濕度、時(shí)間、環(huán)境等因素,《中國(guó)藥典2010版》規(guī)定微生物限度檢驗(yàn)細(xì)菌培養(yǎng)溫度為30~35℃,此溫度適于中溫菌生長(zhǎng),某些高溫菌在該溫度下也可以生長(zhǎng)。藥品污染的控制菌多是中溫菌。根據(jù)不同菌株及檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇不同的培養(yǎng)時(shí)間。根據(jù)細(xì)菌對(duì)環(huán)境要求不同常用培養(yǎng)方法如下:
需氧培養(yǎng)法
此為zui常用的培養(yǎng)方法,適于需氧菌和兼性厭氧菌的培養(yǎng)。
厭氧培養(yǎng)法
厭氧菌的培養(yǎng),必須在無(wú)氧的環(huán)境中進(jìn)。
厭氧培養(yǎng)箱法、抽氣換氣法、厭氧缸法、厭氧培養(yǎng)罐、厭氧袋 。
微需氧培養(yǎng)法
有些細(xì)菌為微需氧菌在微需氧環(huán)境(5%02、10%CO2、85%N2)生長(zhǎng)良好,微需氧培養(yǎng)法常用的有以下幾種:
混合氣體法、氣袋法、雙平板法、燭缸法
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