在金標(biāo)檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)的操作中有很多步驟,每一步都很重要,今天就介紹一下elisa試劑盒顯色的重要性。
顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時(shí)間的延長而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測定中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測定的顯色可在室溫進(jìn)行,時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制,有時(shí)可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時(shí)間,及時(shí)判斷。
OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深,再延長反應(yīng)時(shí)間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色,顯色反應(yīng)應(yīng)避光進(jìn)行,顯色反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入終止液終止反應(yīng)。OPD產(chǎn)物用酸終止后,顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。
TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺上,邊反應(yīng)觀察結(jié)果。但為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性,宜在規(guī)定的適當(dāng)時(shí)間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后,約40分鐘顯色達(dá),隨即逐漸減弱,至2小時(shí)后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種,金標(biāo)檢測試劑盒疊氮鈉和SDS等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時(shí)間(12-24小時(shí))不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時(shí)可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。
500mg 63-74-1 磺胺熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)品
500mg 66-75-1 烏拉莫司汀標(biāo)準(zhǔn)品
500mg 6700-34-1 氫溴酸右*標(biāo)準(zhǔn)品
500mg 84494-72-4 順—二十二碳六烯酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)品
500mg 86227-47-6 二十烷五烯酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)品
500mg 純化葡萄籽低聚原花青素標(biāo)準(zhǔn)品
Methyl Linoleate 5×50mg 112-63-0 *甲酯標(biāo)準(zhǔn)品
Methyl Linolenate 5×50mg 301-00-8 亞麻酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品
Insulin Lispro 5.97mg 133107-64-9 賴脯胰島素標(biāo)準(zhǔn)品(2-8℃)
5.25oz 氟化牙粉:單氟磷酸鈉(1500 ppm)/二氧化硅標(biāo)準(zhǔn)品
5.25oz "
氟化牙粉:單氟磷酸鈉(1000 ppm)/二氧化硅標(biāo)準(zhǔn)品
5 vials 50-56-6 羥可待酮標(biāo)準(zhǔn)品
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