IL-11是由骨髓基質(zhì)細胞產(chǎn)生的一種細胞因子，具有促進多系造血，增強T細胞、單核細胞依賴的B細胞抗體的生成，刺激肝細胞表達急性時相蛋白，誘導(dǎo)神經(jīng)組織分化等功能。目前已獲樣重組人IL-11（rhlL-11）。
本法是基于IL-11可促進T10細胞的生長。因IL-6也有輕微的促T10細胞生長功能，在標本中可能含IL-6時，應(yīng)用針對IL-6的中和抗體封閉后再測定。
1．向96孔培養(yǎng)板中每孔加RPMI-1640100／~L，A排1—3孔不加。
2．稀釋IL-11標準品成50U／mL，按如下稀釋加樣：A排1—3孔加入1501uL，轉(zhuǎn)移50／xL加入B排1—3孔，混勻；自B排1—3孔轉(zhuǎn)移50／xL至C排1～3孔，如此依次進行至G排。H排1～3孔留作對照。
3．A排第4～6孑L、7—9孑L、10—12孑L各力口——種待測樣本，E排4—6孔、7—9孔、10—12孔加另三種樣本，同上法從A—D、E—H進行系列稀釋。
以上為3倍系列稀釋，也可根據(jù)需要調(diào)整稀釋倍數(shù)，使IL-11zui低濃度為0．1～10U／L。
4。收獲T10細胞，室溫1 500r／rain離心5min，洗2次。
5．用5mL*RPMI-1640培養(yǎng)液重新懸浮細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，調(diào)整細胞濃度至7．5X104／mi．。
6．向上述培養(yǎng)板中每孔加細胞懸液100／uL，培養(yǎng)3d，加3H-TdR，以下步驟同IL-2測定。
[附）T10細胞的維持培養(yǎng)：T10細胞是IL-6依賴性小鼠漿細胞瘤細胞系T1165在IL-“選擇下分化而來，其長期培養(yǎng)方法如下：①細胞自液氮中取出解凍后，用RPMI-164010mL懸浮，1 500r／min離心10rain，洗去DMSO；②用5mL培養(yǎng)液稀釋細胞，計數(shù)活細胞，用*RPMI-1640培養(yǎng)液調(diào)整細胞濃度為105／mL，接種培養(yǎng)瓶；③加1 000U／mL的IL-110．2mL于培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)3、4山④收獲細胞，同上離心后，取5X105個活細胞接種于培養(yǎng)瓶，加培養(yǎng)液至10mL，同上加IL-11，培養(yǎng)傳代。并注意觀察培養(yǎng)細胞，若活細胞數(shù)<70％，降低細胞濃度至2X104／ml.
