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技術(shù)文章

補體B因子（Bf）遺傳多態(tài)性的檢測

閱讀：570發(fā)布時間：2012-3-3

1．原理與方法基本上和C4高壓電泳及免疫固定技術(shù)一致，樣本不需經(jīng)神經(jīng)氨酸酶和羧肽酶B處理，電泳時直接加10uL EDTA抗凝血漿。凝膠板規(guī)格為125mmX260mmX3mm，電泳時電壓控制在85mA，時間3～4h或血紅蛋白遷移至離加樣孔5．5em處時，停止電泳。用1：4或1：2稀釋的抗Df血清（AtlanticAntibodiesTATB，USA或上海長征醫(yī)院產(chǎn)品）進行免疫固定。依照Mauff提出的BF定型圖命名。

2．所需試劑 *緩沖液：*34。56g，NaOH6．00g，*1．23g，加蒸餾水至
2Lo此溶液為電泳緩沖液。

1％瓊脂糖的配制：稱取1．0g瓊脂糖（1CN或SEAKEM．M．E）加*緩沖液66mL，然后加蒸餾水至100mL，隔水煮沸或微波爐中加熱至瓊脂糖*溶解透明為止。

3．操作 同C4免疫固定。


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