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補體遺傳多態(tài)性的檢測

閱讀：516發(fā)布時間：2012-2-25

補體遺傳多態(tài)性的檢測大多分二步進行，*步是用瓊脂糖高壓電泳或聚丙烯酰胺等電聚焦電泳將EDTA抗凝血漿通過凝膠電泳，根據(jù)分子量的大小、所帶電荷的多少及等電點（p1）將血漿蛋白分開。第二步是免疫固定或溶血鑒定，瓊脂糖高壓電泳或聚丙烯酰胺等電聚焦后，在凝膠板上鋪上抗補體某一成分的抗血清，使其與凝膠板上的抗原結合，形成分子量較大的免疫復合物沉淀嵌在凝膠孔中，不易漂洗掉，故稱免疫固定。將免疫固定后的凝膠板在生理鹽水中漂洗，除去其他蛋白成分?？靖?，考馬斯亮藍染色。

依照第六屆補體定型會議標準或標準品，判斷待測樣本補體的同種異型?；蛴萌苎▽⒅旅鬝RBC和缺乏某一補體成分的豚鼠血清或人血清混合，傾倒在電泳完畢的凝膠板上，凝膠板上的待測補體成分使缺乏的補體成分得以補償，酶反應發(fā)生，導致溶血反應，凝膠板上可出現(xiàn)待測樣本補體某一成分的溶血帶。

補體C4有兩個基因座位，分別為C4A、C4B，兩者均表現(xiàn)高度的遺傳多態(tài)性，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)30余種同種異型。C4遺傳多態(tài)性在人類淵源、法醫(yī)鑒定及與疾病相關的研究領域受到極大的重視。C4遺傳多態(tài)性的檢測方法可分兩種，一種是瓊脂糖高壓電泳加免疫固定，另一種是瓊脂糖高壓電泳后加溶血覆蓋。在有抗血清的情況下，使用前者簡單、方便、易行。僅在C4兩個基因座位不易辨別時才采用后者。


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