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技術(shù)文章

膠體金蛋白結(jié)合物的質(zhì)量鑒定

閱讀:699發(fā)布時間:2011-11-26

(1)膠體金顆粒平均直徑的測量:用支持膜的鎳網(wǎng)(銅網(wǎng)也可)蘸取金標(biāo)蛋白試劑,自然干燥后直接在透射電鏡下觀察?;蛴么姿徕檹?fù)染后觀察。計算100個金顆粒的平均直徑。

(2)膠體金溶液的OD520nm值測定:膠體金顆粒在波長510nm~550nm之間出現(xiàn)zui大吸收值峰。用0.02Mol/L pH8.2 PBS液(含1%BSA,0.02%NaN3)將膠體金蛋白試劑作1︰20稀釋,OD520=0.25左右。一般應(yīng)用液的OD520應(yīng)為0.2~0.4。

(3)金標(biāo)記蛋白的特異性與敏感性測定:采用微孔濾膜免疫金銀染色法(MF-IGSSA)。將可溶性抗原(或抗體)吸附于載體上(濾紙、硝酸纖維膜、微孔濾膜),用膠體金標(biāo)記的抗體(或抗原)以直接或間接染色法并經(jīng)銀顯影來檢測相應(yīng)的抗原或抗體,對金標(biāo)記蛋白的特異性和敏感性進(jìn)行鑒定。


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