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技術(shù)文章

可的松ELISA 試劑盒(尿液*)

閱讀:654發(fā)布時(shí)間:2014-4-4

實(shí)驗(yàn)原理

樣本中的尿液*與辣根過氧化物酶標(biāo)記的*競(jìng)爭(zhēng)連結(jié)到包被板中的抗*抗體。

溫育后,經(jīng)洗滌,連結(jié)的與游離的*分開。加入H2O2和TMB底物液,經(jīng)一段時(shí)間后,生成了顏色,加入終止液終止酶促反應(yīng)并檢測(cè)吸光度。計(jì)算尿液中*需要一系列的標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣本中尿液*濃度與顏色強(qiáng)度成正相關(guān)。

試劑、材料和儀器

提供的試劑和材料

1 *標(biāo)準(zhǔn)品 STD0-STD4

2 孵化緩沖液

  磷酸鹽緩沖液

3 酶聯(lián)物 HRP標(biāo)記的*

4 包被板,可分拆

5 TMB底物液

6 終止液

7 質(zhì)控品(低)

8 質(zhì)控品(高)

儀器

移液器

酶標(biāo)儀(450nm)

 

實(shí)驗(yàn)步驟: 略

 

結(jié)果

平均吸光度

計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品、樣本的平均吸光度值。

標(biāo)準(zhǔn)曲線

以標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值為Y軸,相應(yīng)的濃度為X軸,作出*的擬合曲線(可選擇4參數(shù)邏輯函數(shù))。

計(jì)算結(jié)果

將樣本的吸光度值插入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,則可讀出相應(yīng)的濃度,單位為ng/ml。

計(jì)算尿液中*濃度(24h),按以上計(jì)算出濃度,然后再乘以24小時(shí)內(nèi)的尿液總體積

ng/ml x 24小時(shí)尿液體積(ml)/1000=µg Cortisol/24h

參考值

50—190µg/24h


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