單染色
將熱固定的涂片放在有水槽的染色架上，用Loeffler亞甲基藍(lán)溶液染色5min，輕輕淋 洗玻片，用干凈的吸紙或?yàn)V紙吸干。
革蘭氏染色
這是一種復(fù)染方法，是對多數(shù)細(xì)菌進(jìn)行初步鑒定的基本方法。在該方法中，先用結(jié)晶 紫對涂片染色用碘液媒染,然后用乙醇、丙酮或乙醇和丙酮的復(fù)合液脫色，這一步能脫 掉革蘭氏陰性菌體中的紫色，但卻不能使革蘭氏陽性闡脫色，zui后用沙黃染液復(fù)染，將革 蘭氏陰性菌染成橘紅色。
用這種染色方法對以將細(xì)菌分成兩類：
(1) 革蘭氏陽性菌這類菌不能用乙醇脫色，呈現(xiàn)紫色，如鏈球菌、芽孢菌等。
(2) 革蘭氏陰性歯在顯微鏡下呈現(xiàn)粉色，如假單胞菌、大腸桿菌等。
注意：使用菌齡較短的菌株(18~24h)進(jìn)行革蘭氏染色或采用包括幼齡菌在內(nèi)的各 種菌齡的菌株做涂片時(shí)，因?yàn)橐恍┚觌S菌齡的變化在革蘭氏染色反應(yīng)和形態(tài)學(xué)上會(huì)發(fā) 生變化：
革蘭氏染色法有很多改進(jìn)的形式,例如Silverton和Anderson( 1961), Bloows( 1991) 等。使用的試劑和時(shí)間取決于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部常用菌株的特性,伹使用者的偏愛也對方法的 選擇有影響;相對于側(cè)重染色操作步驟是否有差異的方法來說，以下介紹的染色方法中 的試劑使用范圍較寬，十分適用于通常的染色。然而，要獲得滿意的染色效果，要嚴(yán)格按 照方法的操作步驟進(jìn)行，尤其在脫色階段。 橾作步驟
(J)將經(jīng)過18~24h培養(yǎng)的菌株，按常規(guī)的方式涂抹一個(gè)涂片，并加熱固定；
(2) 用結(jié)晶紫染色2mm。注意染色液要覆蓋到所有的涂抹范圍（以下的操作步驟相同)；
(3) 拿住玻片使之成45度角，沖洗掉涂片上所有的結(jié)晶紫溶液，然后用碘溶液媒染1min;
(4) 倒掉碘溶液，吸干，拿住玻片成45度角，用95％的乙醇(或工業(yè)甲醇）沖洗玻片，直到不再有紫色溶液從玻片上流下為止(對于薄的涂片來說需要5~15s)；
(5) 用流水淋洗后用1%的沙黃溶液染色15s;
(6) 將玻片充分洗凈吸干。
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