1、生物安全柜安裝及操作注意事項(xiàng)

（1）位置

空氣通過前面開口進(jìn)入生物安全柜的速度大約為0.3m/s~0.5m/s。這樣速度的定向氣流是極易受到干擾的，包括人員走近生物安全柜所形成的氣流，打開窗戶，送風(fēng)系統(tǒng)調(diào)整以及開關(guān)門等都可能造成影響。因此，生物安全柜應(yīng)避免位于人員活動、物品流動以及可能會擾亂氣流的地方。在安全柜的后方以及每一個(gè)側(cè)面要盡可能留有空間，以便準(zhǔn)確測量空氣通過排風(fēng)過濾器的速度，并便于排風(fēng)過濾器的更換。

（2）操作人員

生物安全柜如果使用不當(dāng)，其防護(hù)作用就可能大大地受到影響。操作人員在移動雙臂進(jìn)出安全柜時(shí)，需要小心維持前面開口處氣流的完整性，雙臂應(yīng)該垂直地緩慢進(jìn)出前面的開口。

手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約1min，以便安全柜調(diào)整完畢并且讓里面的空氣“掃過”手和雙臂的表面以后，才可以開始對物品進(jìn)行處理。要在開始實(shí)驗(yàn)之前將所有必須的物品置于安全柜內(nèi)，以盡可能減少雙臂進(jìn)出前面開口的次數(shù)。

（3）物品放置

II級生物安全柜前面的進(jìn)氣格柵不能被紙、儀器設(shè)備或其他物品阻擋。放入安全柜內(nèi)的物品應(yīng)采用70%酒精來消除表面污染?？梢栽谙緞┙竦拿砩线M(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以吸收可能濺出的液滴。

所有物品應(yīng)盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺邊緣的位置，并使其在操作中不會阻擋候補(bǔ)格柵?？僧a(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備（例如混勻器、離心機(jī)等）應(yīng)靠近安全柜的后部放置。像有生物危害性的廢棄物袋，盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶等體積較大的物品，應(yīng)該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè)。在工作臺面上的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進(jìn)行。

耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤不應(yīng)放在安全柜的外面，否則在使用這些物品時(shí)雙臂就必須頻繁進(jìn)出安全柜，這樣會干擾安全柜空氣屏障的完整性，從而影響對人員和物品的防護(hù)。

（4）日常維護(hù)

大多數(shù)生物安全柜的設(shè)計(jì)允許全天24h工作。研究人員發(fā)現(xiàn)，連續(xù)工作有助于控制實(shí)驗(yàn)室中灰塵和顆粒的水平。向房間中排風(fēng)或通過套管接口與專門的排風(fēng)管相連接的I級A1和A2型生物安全柜，在不使用時(shí)是可以關(guān)閉的。其他如II級B1和II級B2型生物安全柜，是通過硬管安裝的，就必須始終保持空氣流動以維持房間空氣的平衡在開始工作以前以及完成工作以后，應(yīng)至少讓安全柜工作5min來完成“凈化”的過程，確保受污染的空氣安全排出安全柜。

生物安全柜的所有維修工作應(yīng)該由有資質(zhì)的專業(yè)人員來進(jìn)行。在生物安全柜操作中出現(xiàn)的任何故障都應(yīng)該報(bào)告，并應(yīng)在再次使用之前進(jìn)行維修。

（5）紫外燈

生物安全柜中不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話，應(yīng)該每周進(jìn)行清潔，以出去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。在安全柜重新認(rèn)證時(shí)，要檢查紫外線的強(qiáng)度，以確保有適當(dāng)?shù)墓獍l(fā)射量。房間中有人時(shí)一定要關(guān)閉紫外燈，以保護(hù)眼鏡和皮膚，避免因不慎暴露而造成傷害。

（6）明火

在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中，應(yīng)避免使用明火。使用明火會對氣生影響，并且在處理揮發(fā)性物品和易燃物品時(shí)，也易造成危險(xiǎn)。在對接種環(huán)進(jìn)行滅菌時(shí)，可以使用微型燃燒器或電爐，而不應(yīng)使用明火。

（7）溢出

實(shí)驗(yàn)室中要張貼如何處理溢出物的實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)則，每一位使用實(shí)驗(yàn)室的成員都要閱讀并理解這些規(guī)則。一旦在生物安全柜中發(fā)生由生物學(xué)危害的物品溢出時(shí)，應(yīng)在安全柜處于工作狀態(tài)下時(shí)立即進(jìn)行清理。要使用有效的消毒劑，并在處理過程中盡可能減少氣溶膠的生成。所有接觸溢出物品的材料都要進(jìn)行消毒和（或）高壓滅菌。

（8）評估

在安裝使用一定時(shí)間以后，應(yīng)由有資質(zhì)的專業(yè)人員按照生產(chǎn)商的說明對每一臺生物安全柜的運(yùn)行性能以及完整性進(jìn)行認(rèn)證，一檢查其是否符合國家標(biāo)準(zhǔn)要求。安全柜防護(hù)效果的評估應(yīng)該包括對安全柜的完整性，HEPA過濾器的泄漏，向下氣流的速度，正面氣流的速度，負(fù)壓/換氣次數(shù)，氣流的煙霧模式以及警報(bào)和互鎖系統(tǒng)進(jìn)行測試。

還可以選擇漏電，光照度，紫外線強(qiáng)度，噪聲水平以及震動性的測試。在進(jìn)行這些測試時(shí)，檢測人員要經(jīng)過專門的培訓(xùn)，采用專門的技術(shù)和儀器設(shè)備。強(qiáng)烈建議由有資質(zhì)的專業(yè)人員進(jìn)行測試。

（9）清潔和消毒

由于剩余的培養(yǎng)基可能會使微生物生長繁殖，因此在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，包括儀器設(shè)備在內(nèi)的生物安全柜里的所有物品都應(yīng)清除表面污染，并移出安全柜。

在每次使用前后要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。工作臺面和內(nèi)壁要用消毒劑進(jìn)行擦拭，所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里可能發(fā)現(xiàn)的任何微生物。在每天試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，應(yīng)擦拭生物安全柜的工作臺面、四周以及玻璃的內(nèi)外側(cè)等部位來清除表面的污染。在對目標(biāo)生物體有效時(shí)，可以采用漂白劑溶液或70%酒精來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后，還必須用無菌水再次進(jìn)行擦拭。

推薦將安全柜一直維持運(yùn)行狀態(tài)。如果要關(guān)閉的話，則應(yīng)在關(guān)機(jī)前運(yùn)行5min以凈化內(nèi)部的空氣。

（10）清除污染

生物安全柜在移動以及更換過濾器之前，必須清除污染。zui常用的方法是采用甲醛蒸汽熏蒸。應(yīng)該由有資質(zhì)的專業(yè)人員來清除生物安全柜的污染。

（11）個(gè)體防護(hù)裝備

在使用生物安全柜時(shí)應(yīng)穿著個(gè)體防護(hù)服。在進(jìn)行一級和二級生物安全水平的操作時(shí)，可穿著普通試驗(yàn)服。前面加固處理的反背式試驗(yàn)隔離衣具有更好的防護(hù)效果，應(yīng)在進(jìn)行三級和四級生物安全水平（防護(hù)服型實(shí)驗(yàn)室除外）的操作時(shí)使用。手套應(yīng)套在隔離衣的外面，可以戴加有松緊帶的袖套來保護(hù)研究人員的手腕。有些操作可能還需要戴口罩和安全眼鏡。

（12）警報(bào)器

可以在兩種警報(bào)器（窗式和氣流）中選擇一種來裝備生物安全柜。窗式警報(bào)器只能裝在帶有滑動窗的安全柜上。發(fā)出警報(bào)時(shí)表明操作者將滑動窗移到了不當(dāng)?shù)奈恢?。處理這種警報(bào)時(shí)，只要將滑動窗移到適宜的位置就可以了。氣流警報(bào)器報(bào)警時(shí)，表明安全柜的正常氣流模式受到了干擾，操作者或物品已經(jīng)處于危險(xiǎn)狀態(tài)。當(dāng)氣流警報(bào)響起時(shí)，應(yīng)立刻停止工作，并通知實(shí)驗(yàn)室主管。生產(chǎn)商的說明手冊中應(yīng)提供更詳細(xì)的資料，在生物安全柜的使用培訓(xùn)中也應(yīng)包括這一方面的內(nèi)容。

（13）補(bǔ)充資料

選擇正確類型的生物安全柜，進(jìn)行安裝并正確使用，同時(shí)每年進(jìn)行認(rèn)證，這是一個(gè)復(fù)雜的程序。強(qiáng)烈推薦在經(jīng)過良好培訓(xùn)并具有豐富生物安全操作經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)人員監(jiān)督下進(jìn)行上述工作。