一、技術(shù)原理試劑盒基于多重PCR技術(shù)(multiplexPCR)，在阪崎克羅諾桿菌同一PCR反應(yīng)體系中加入2對引物，于樣本中基因組的相應(yīng)靶位點特異性結(jié)合，同時擴增出2條核酸片段的PCR反應(yīng)，其反應(yīng)原理，反應(yīng)試劑和操作過程與一般PCR相同

詳細介紹

一、 技術(shù)原理

試劑盒基于多重PCR技術(shù)(multiplex PCR)，在阪崎克羅諾桿菌同一PCR反應(yīng)體系中加入2對引物，于樣本中基因組的相應(yīng)靶位點特異性結(jié)合，同時擴增出2條核酸片段的PCR反應(yīng)，其反應(yīng)原理，反應(yīng)試劑和操作過程與一般PCR相同。擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖電泳和紫外儀觀察，在目標(biāo)位置處出現(xiàn)兩條特異性條帶時，即為陽性結(jié)果。

“＋"表示結(jié)果為阪崎克羅諾桿菌；“－"表示結(jié)果為非阪崎克羅諾桿菌

二、阪崎克羅諾桿菌雙重PCR檢測試劑盒組成

組分名稱	規(guī)格×數(shù)量
干粉試劑	8管×3排
復(fù)溶液	600μL×1管
陽性對照	1管（凍干型）
陰性對照	1管（凍干型）
裂解液	1 mL×1管
超純水	1 mL×1管
loading buffer	120μL×1管
說明書	1份

三、阪崎克羅諾桿菌雙重PCR檢測試劑盒特點

l 高效鑒定：通過同步擴增阪崎克羅諾桿菌的特異靶位基因16s rDNA和外膜蛋白A基因OmpA，實現(xiàn)快速對克羅諾阪崎腸桿菌的鑒定。

l 使用簡單：產(chǎn)品試劑盒對反應(yīng)體系進行凍干粉處理，溶解后加入樣品核酸即可進行擴增，減少繁瑣的溶液組分配置過程，降低人為操作帶來的結(jié)果偏差。

l 儀器要求低：具備開展分子生物學(xué)實驗條件的實驗室即可實現(xiàn)操作。

l 鑒定快速：試劑盒使用簡單，試驗從樣品處理到得到結(jié)果3h左右即可完成。

l 特異性和靈敏度高：廣東環(huán)凱微生物科技有限公司擁有豐富的菌種資源庫，食源性致病菌菌株超過13000株。憑借豐富的菌株資源，該試劑盒經(jīng)過了十幾種超過300株的標(biāo)準(zhǔn)菌株和分離株的特異性驗證，保證了試劑盒的檢測特異性，其檢驗限高達300 CFU/test。

四、雙重PCR檢測操作流程（全程僅需約3小時）

五、試劑盒操作示意圖

六、需要配套的儀器及耗材列表

所需的儀器	規(guī)格	備注
移液槍、槍頭	1-10 μL、10-200 μL和100-1000 μL各一把	槍頭推薦國產(chǎn)槍頭即可。
離心機	轉(zhuǎn)速不低于12,000 rpm，離心機轉(zhuǎn)子支持200 μL和1.5 mL離心管離心。	建議用進口離心機。
PCR儀器	國產(chǎn)或進口產(chǎn)品皆可。	能準(zhǔn)確提供梯度變溫的PCR儀器。
電泳儀和電泳槽	國產(chǎn)上海天能公司產(chǎn)品、進口Bio-Rad電泳儀
瓊脂糖	西班牙瓊脂糖G-10	用于DNA電泳用瓊脂糖即可
紫外觀察儀	進口UVITECH、國產(chǎn)紫外觀察儀系統(tǒng)	需要數(shù)據(jù)記錄需要配有拍攝系統(tǒng)

關(guān)鍵詞：移液槍離心機電泳儀

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