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上海酶聯(lián)生物研究所
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閱讀：605發(fā)布時(shí)間：2010-06-24
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常見(jiàn)的免疫檢測(cè)五大技術(shù)
（一）免疫酶染色試驗(yàn) （immunoenzyme staining test，IEST） 免疫酶染色試驗(yàn)以含寄生蟲(chóng)病原的組織切片、印片或培養(yǎng)物涂片為固相抗原，當(dāng)其與待測(cè)標(biāo)本中的特異性抗體結(jié)合后，可再與酶標(biāo)記的第二抗體反應(yīng)形成酶標(biāo)記免疫復(fù)合物，后者可與酶的相應(yīng)底物作用而出現(xiàn)肉眼或光鏡下可見(jiàn)的呈色反應(yīng)。
（二）皮內(nèi)試驗(yàn) （intrader rpmal test,ID） 宿主在病原體刺激后，體內(nèi)產(chǎn)生親細(xì)胞性抗體（IgE和IgG4）。當(dāng)其與相應(yīng)抗原結(jié)合后，肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒，釋放生物活性物質(zhì)，引起注射抗原的局部皮膚出現(xiàn)皮丘及紅暈，以此便可判斷體內(nèi)是否某有種特異性抗體存在。
（三）免疫擴(kuò)散（immunodiffusion）和免疫電泳（immunoelectrophoresis）
1．免疫擴(kuò)散 于一定條件下，抗原與抗體在瓊脂凝膠中相遇，在二者含量比例合適時(shí)形成肉眼可見(jiàn)的白色沉淀。本法有兩種類型：①單相免疫擴(kuò)散：將一定量的抗體混入瓊脂凝膠中，使抗原溶液在凝膠中擴(kuò)散而形成沉淀環(huán)，其大小與抗原量成正比；②雙相免疫擴(kuò)散：將抗原與抗體分別置于凝膠板的相對(duì)位置，二者可自由擴(kuò)散并在中間形成沉淀線。用雙相免疫擴(kuò)散法既可用已知抗原檢測(cè)未知抗體，也可用已知抗體檢測(cè)未知抗原。
2．免疫電泳 是將免疫擴(kuò)散與蛋白質(zhì)凝膠電泳相結(jié)合的一項(xiàng)技術(shù)。事先將抗原在凝膠板中電泳，之后在凝膠槽中加入相應(yīng)抗體，抗原和抗體雙相擴(kuò)散后，在比例合適的位置，產(chǎn)生肉眼可見(jiàn)的弧形沉淀線。
（四）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) （enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）
vvv 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理是將抗原或抗體與底物（酶）結(jié)合，使其保持免疫反應(yīng)和酶的活性。把標(biāo)記的抗原或抗體與包被于固相載體上的配體結(jié)合，再使之與相應(yīng)的無(wú)色底物作用而顯示顏色，根據(jù)顯色深淺程度目測(cè)或用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值判定結(jié)果。
（五）對(duì)流免疫電流試驗(yàn) （counter-immunoelectrophoresis，CIE） 對(duì)流免疫電泳試驗(yàn)是以瓊脂或瓊脂糖凝膠為基質(zhì)的一種快速，敏感的電泳技術(shù)。既可用已知抗原檢測(cè)抗體，又可用已知抗體檢測(cè)抗原。反應(yīng)結(jié)果可信度高，適用范圍廣。以本法為基礎(chǔ)改進(jìn)的技術(shù)有酶標(biāo)記抗原對(duì)流免疫電泳（enzyme-linked antigen counterimmunoelectrophoresis,ELACIE ）和放射對(duì)流免疫電泳自顯影（radio-immuno-counterelectrophoretic autography，RCIEPA）等技術(shù)。二者克服了電泳技術(shù)本身不夠靈敏的弱點(diǎn)。
（六）間接紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)（indirect haemagglutination test，IHA） 以紅細(xì)胞作為可溶性抗原的載體并使之致敏。致敏的紅細(xì)胞與特異性抗體結(jié)合而產(chǎn)生凝集，抗原與抗體間的特異性反應(yīng)即由此而顯現(xiàn)。常用的紅細(xì)胞為綿羊或O型人紅細(xì)胞。
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