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胰島素放免試劑盒操作說明書

閱讀：1518發(fā)布時間：2010-04-20

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胰島素放免試劑盒操作說明書
                                                                                                 INS（HY-055） RIA  KIT
 
胰島素（Insulin INS）是胰島B細(xì)胞合成和分泌的一種多肽激素，分子量約 6000，它由α、
β兩條肽鏈組成。它的主要功能增加細(xì)胞膜對葡萄糖、氨基酸及鉀離子的通透性，促進(jìn)這些物質(zhì)
進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)；促進(jìn)糖原合成酶由非活化型轉(zhuǎn)化為活化型，促進(jìn)糖的利用，抑制脂肪分解，促進(jìn)脂類
合成；促進(jìn)RNA、DNA及蛋白質(zhì)的合成，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞的構(gòu)成、能量的貯備和細(xì)胞功能調(diào)節(jié)等。測
定人血清或血漿胰島素含量主要用于對糖尿病的研究，確定糖尿病的類型，胰島素β細(xì)胞的分泌功能，胰島素瘤的診斷，對探討冠心病機(jī)理，研究某些藥物對糖代謝影響及各種內(nèi)分泌紊亂疾病等都有一定的意義和價值。
 
     樣品采集：用*靜脈采血，待血液凝固后分離血清。血清-20℃冰凍保存，可使用
                兩個月。溶血樣品，枸椽酸抗凝樣品不能應(yīng)用。
 
 藥盒組成：
  1、125I- INS 1 瓶。
  2、INS抗體1瓶。
  3、INS標(biāo)準(zhǔn)品7瓶，濃度為5、10、20、40、80、160 цIU/ml。
  4、緩沖液 1瓶       
  5、免疫分離劑（第二抗體） 1瓶。
  6、質(zhì)控血清2瓶。    
 
  操作方法：
                         INS  RIA  KIT操作程序（單位：ul）
         ————————————————————————————
               試   劑      T      NSB      S0       S1~S6     樣 品
             ————————————————————————————
               零 標(biāo) 準(zhǔn)    ——    200      100       ——      ——             
               標(biāo) 準(zhǔn) 品    ——    ——    ——       100       ——
               標(biāo)      品    ——    ——     ——       ——       100
               抗      體    ——    ——     100       100       100
            ————————————————————————————   
                         充分混勻，37℃ 溫育0.5小時
            ————————————————————————————   
 
                      125I- 胰島素    100   100       100       100       100
              ————————————————————————————   
                         充分混勻，37℃ 溫育2小時
              ————————————————————————————             
               分 離 劑    ——   1000     1000       1000     1000
              ————————————————————————————
         混勻，室溫15分鐘，3500 轉(zhuǎn)/分 離心15分鐘，去上清，測定沉淀cpm-值。
 
  結(jié)果計算：
     以N/T、B/T計算NSB、S0結(jié)合百分率，以B/B0計算標(biāo)準(zhǔn)及待測物結(jié)合百分率，
  在半對數(shù)座標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，查出樣品值或由自動Υ-計數(shù)儀器直接讀出結(jié)果。
  注意事項：
       1、本月標(biāo)準(zhǔn)品每瓶用         ml緩沖液稀釋；
          本月藥盒抗體每瓶用       ml緩沖液稀釋；
          本月藥盒標(biāo)記每瓶用       ml緩沖液稀釋；
       2、收到測定盒后，請放2-8℃冰箱中保存。
          * 3、分離劑在使用前充分混勻（不可冰凍）,標(biāo)記、抗體、溶解后，直接應(yīng)用，冰凍
保存。標(biāo)準(zhǔn)品溶解后，0.1ml分裝，-20℃可放一月，避免反復(fù)凍融。
  本試劑盒主要技術(shù)參數(shù)：
      標(biāo)準(zhǔn)范圍：5-160u IU/ml
      靈敏度： 2 u IU/ml 。
      精密度：批內(nèi)：CV<10%；批間CV為<15% 。
  正常參考值：
各實驗室應(yīng)建立自己的正常值，下列正常參考值僅供參考：          單位：μ IU/mL.

 
組 別
 
空  腹
 
30分鐘
 
60分鐘
 
120分鐘
 
180分鐘
 
正常（N=216）
（100克饅頭餐）
 
 
14.0±8.70
 
 
 
75.8±43.8
 
58.2±38.1
 
22.4±20.6
 
正常（N=87）
（75克葡萄糖）
 
 
12.7±7.10
 
76.7±44.4
 
76.6±33.8
 
46.9±26.7
 
14.9±9.90
 
II型糖尿病例（N=63）
（100克饅頭餐）
 
 
18.8±7.40
 
 
 
48.4±29.3
 
50.4±27.4
 
32.5±14.50

   本月藥盒參考數(shù)據(jù)：  
        ———————————————————————————————————————
                T     NSB     S0           S1      S2      S3      S4      S5      S6
        ———————————————————————————————————————
        CPM
        ———————————————————————————————————————
                N/T%       B0/T%       B/ B0 %
        ———————————————————————————————————————   

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