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上海酶聯(lián)生物研究所
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人 白細(xì)胞介素6ELISA 檢測(cè)試劑盒 自備材料：蒸餾水
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。 樣品收集、處理及保存方法：血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人 白細(xì)胞介素6ELISA 檢測(cè)試劑盒
操作注意事項(xiàng)：
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
人 白細(xì)胞介素6ELISA 檢測(cè)試劑盒
安全性：
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
試劑的準(zhǔn)備：
標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻
洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
試劑盒性能：
1. 靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
人 白細(xì)胞介素6ELISA 檢測(cè)試劑盒
操作步驟：
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混
37℃溫育5分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
結(jié) 果 判 斷 與 分 析：
1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的IL-6標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的IL-6含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度, 再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
3、檢測(cè)值范圍：0-800pg/ml
4、敏感度： 1.0 pg/m
人 白細(xì)胞介素6ELISA 檢測(cè)試劑盒
DA2355-0.2ml MCP-1/CCL2 （monocyte chemotactic protein1）mouse, rat 單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體（大、小鼠） 0.2ml
DA2356-0.2ml MCP-1/CCL2（Monocyte chemotactic protein 1）human 單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體（人） 0.2ml
DA2357-0.2ml MCP-2/CCL8（Monocyte chemotactic protein 2）human 單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體（人） 0.2ml
DA2358-0.2ml MCP-2/CCL8（Monocyte chemotactic protein 2）rat,mouse 單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體（大、小鼠） 0.2ml
DA2359-0.2ml MCP-3/CCL7（Monocyte chemotactic protein 3）human 單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體（人） 0.2ml
DA2360-0.2ml MCP-3/CCL7（Monocyte chemotactic protein 3）（rat,mouse） 單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體（大、小鼠） 0.2ml
DA2361-0.2ml CCL9/CCL10/MIP-1 gamma（Macrophage inflammatory protein 1-γ） 巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1γ抗體 0.2ml
DA2362-0.2ml MC-1R （melanocortin-1-receptor） 黑皮質(zhì)素-1受體抗體 0.2ml
DA2363-0.2ml MCT1（monocarboxylate transporter 1） 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體 0.2ml
DAR1158-0.1ml Rabbit anti-mouse IgM/APC 熒光素APC標(biāo)記兔抗小鼠IgM 0.1ml
DAR1159-0.1ml Rabbit anti-horse IgG/APC 熒光素APC標(biāo)記兔抗馬IgG 0.1ml
DA2364-0.2ml MCM2（minichromosome maintenance protein 2） 微小染色體維持缺陷蛋白2抗體 0.2ml
DA2365-0.2ml MCM3（minichromosome maintenance deficient 3） 微小染色體維持缺陷蛋白3抗體 0.2ml
DA2366-0.2ml MCM7（minichromosome maintenance protein 7） 微小染色體維持缺陷蛋白7抗體 0.2ml
商鋪：http://www.hg1112.cn/st32881/
主營(yíng)產(chǎn)品：ELISA試劑盒，人ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒，豚鼠ELISA試劑盒，兔ELISA試劑盒，羊ELISA試劑盒，牛ELISA試劑盒，雞ELISA試劑盒，鴨ELISA試劑盒，植物ELISA試劑盒
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