反相色譜在國(guó)產(chǎn)液相色譜儀中是應(yīng)用zui廣泛的技術(shù)，主要是因?yàn)樗m用于分析極大多數(shù)的非極性物質(zhì)和離子化合物。大多數(shù)用于反相色譜的固定相都是天然的疏水物質(zhì)，因此，分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小來(lái)分離的。
有時(shí)國(guó)產(chǎn)液相色譜儀反向色譜柱會(huì)被污染，是什么原因造成的呢?
反相色譜柱在國(guó)產(chǎn)液相色譜儀分離檢測(cè)過(guò)程中，分析物和基質(zhì)污染能使固定相受到影響，使用過(guò)程中應(yīng)當(dāng)注意固定相表面特殊性質(zhì)可能與分析物相互作用而使反相色譜柱受到污染產(chǎn)生反壓?jiǎn)栴}。導(dǎo)致國(guó)產(chǎn)液相色譜儀反向色譜柱污染的因素主要有以下兩個(gè)。
*，在反相色譜柱上有很多填料，包括聚合物，聚合物表面涂上硅膠和氧化鋁，無(wú)機(jī)-有機(jī)混合物，涂層氧化鋯和石墨化碳都存在于這些鍵合硅膠上，為增加反相色譜柱的應(yīng)用，常利用各種流動(dòng)相和添加物作用于反相色譜柱，添加物可以改變或修飾填料的表面，有時(shí)候還有可能會(huì)污染鍵合相表面。硅膠表面的疏水鍵合相是硅烷醇，殘留的硅烷醇存在于所有的硅膠鍵合填料中，這些硅烷醇具有弱酸性，因此能與某些待分析物反應(yīng)成為基質(zhì)成分。
第二，樣品中含有的鹽、脂質(zhì)、含脂物質(zhì)、腐質(zhì)酸、疏水蛋白質(zhì)和其它一些物質(zhì)是一些可能在使用時(shí)與HPLC柱發(fā)生相互作用的物質(zhì)。部分非常疏水的樣品基質(zhì)，如：玉米油，高芳香物質(zhì)和蠟?zāi)苷匙」潭ㄏ嘌b填表面并且改變其性質(zhì);含有蛋白質(zhì)物質(zhì)的生物流體也能吸附在填料表面。有些物質(zhì)有比待測(cè)物或少或大的保留值，那些保留值較小的物質(zhì)如鹽類(lèi)一般來(lái)說(shuō)在空體積時(shí)就被沖出色譜柱，這些非目標(biāo)產(chǎn)物的被檢測(cè)器檢測(cè)到而且能形成色譜峰，氣泡，基線上移或者是負(fù)峰。如果樣品成分在柱子中有很強(qiáng)的保留而且流動(dòng)相溶液成分不足以把這些物質(zhì)洗脫下來(lái)，多次上樣后，這些吸附在柱子表面的物質(zhì)通常就會(huì)積累在柱頭。
以上兩個(gè)因素會(huì)造成國(guó)產(chǎn)液相色譜儀反向色譜柱的污染，所以我們?cè)谝合嗌V中遇到上面的情況時(shí)要格外注意一下。
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