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技術(shù)文章

液相色譜儀分析 定量與方證的完善

閱讀：16發(fā)布時間：2022-9-27

  一旦完成了液相色譜儀檢測方法建立，應對其進行論證，進行全面論證通常需通過簡略核查方法的專屬性、線性、準確性、精密度、回收率、靈敏度等而實施。在zui終論證方法之前，應準備和檢查書面分析方案，使之清晰、嚴密。實際的論證程序按方法的重要性不同，需時為1天一2周不等。理想的情況是，通過方證能找出可能因儀器和操作者的不同而導致的潛在問題。

  在日常HPLC分析中，柱間重現(xiàn)性可能是主要問題之一。同種方法在不同批號的色譜柱上可能有不同的結(jié)果，任何意外的結(jié)果都應進行研究，以找出其原因，避免在日后的工作中出現(xiàn)同類錯誤。 

  完善方法 

  1. 應預備數(shù)據(jù)表明所需方法的性能； 

  2. 應有為其它操作者使用的書面分析步驟； 

  3. 以一個以上的系統(tǒng)或操作者，用包括期望組分和期望被測物濃度的樣品 系統(tǒng)地論證方法的性能；比較不同時間和不同實驗室之間的實驗數(shù)據(jù)；

  4. 應得到色譜柱的期望壽命以及柱間重現(xiàn)性的數(shù)據(jù)；

  5. 研究不正常的結(jié)果，以糾正潛在的問題； 

  6. 研究所有影響分離的條件（溫度、流動相組成、pH等）；

  規(guī)定這些條件的限度；對可能發(fā)生的問題（關(guān)鍵譜峰對分離不足；隨運行時間延長，zui末譜峰保留值增加等）提出建議措施。 

  這些條件的要求適用于滿足精密準確、穩(wěn)定可靠并可移植轉(zhuǎn)讓的嚴格HPLC標準方法。在其它情況下，可能只要求一次成功的分離或能快速、“粗略"地答復某一特定問題，此時可部分許多建議，僅明白并知道一個方法建立方案的真實目標就足夠了。


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