各國的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)對生物柴油產(chǎn)品中的總甘油含量（鍵合甘油含量+游離甘油含量）和游離甘油含量都作出了限制。其中“鍵合甘油”并不是甘油，而是指生物柴油中甘油三酯、甘油二酯和甘油單酯的總量。
甘油和甘油酯是生物柴油生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的主要副產(chǎn)物，在生物柴油燃燒的過程中，它們會沉積在發(fā)動機中，這對發(fā)動機的正常運轉(zhuǎn)是有害的。業(yè)界一致認(rèn)為，甘油和甘油酯的含量是決定生物柴油品質(zhì)的一個主要因素。同時，通過測定游離甘油和總甘油的含量也能看出原料的反應(yīng)程度，這對生物柴油制備過程的監(jiān)控意義重大。
因為各技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的甘油類物質(zhì)的含量上限較低，所以人們需要而可靠的方法來進(jìn)行分析測定。通常選用毛細(xì)管氣相色譜法來實現(xiàn)。有學(xué)者聲稱只有GC能夠滿足測定生物柴油中低含量甘油酯的所有要求。但是在進(jìn)行測定之前，必須先將標(biāo)樣的純度用液相色譜儀進(jìn)行檢測，否則如果標(biāo)樣物質(zhì)不純，會導(dǎo)致氣相色譜儀的分析結(jié)果不準(zhǔn)確。
zui初人們采用基于酶催化結(jié)合分光光度計的方法來分析生物柴油中的甘油類物質(zhì)。但這種方法比較復(fù)雜，可重復(fù)性也比較差。
1992年，Bondioli等提出了一種GC-FID聯(lián)用的方法，以測定生物柴油中的游離甘油。后來人們又研發(fā)了一種將GC-MS聯(lián)用來對生物柴油中的甘油酯進(jìn)行定量分析的方法。該法使用一根(5%苯基)-甲基聚硅氧烷柱與質(zhì)譜儀聯(lián)用，能夠得到非常準(zhǔn)確的定量分析數(shù)據(jù)。但是在進(jìn)行分析之前要用N,O-雙（*基硅烷基）三（BSTFA）對樣品進(jìn)行硅烷化。
Mitbach等提出用GC-MS法也可以測定生物柴油中的游離甘油含量，而且精度高，速度快，還可同時測定生物柴油中的甲醇。
1995年Plank等]研究出了另一種GC-FID法，可以同時測定生物柴油樣品中的甘油和各種甘油酯。后來，這種方法先后被歐盟的EN14105標(biāo)準(zhǔn)、美國的ASTM6584標(biāo)準(zhǔn)和我國的GB/T20828標(biāo)準(zhǔn)所采用。但是這個方法仍然有其缺陷。
2007年Chong等提出了一種測定甘油酯類的新方法，他們先用含氟酸的酸酐將酯類氟化，然后將GC-MS技術(shù)和FT-IR聯(lián)用，測定生物柴油中的甘油酯。這種方法可以減少分析時間和成本。
將HPLC和GC聯(lián)用，充分發(fā)揮HPLC的分離優(yōu)勢，也可以測定生物柴油中的游離甘油量和總甘油量。這兩項技術(shù)聯(lián)用可以使GC的色譜圖變得比較簡單，這樣可以在圖上標(biāo)出更多更可靠的峰。
