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技術(shù)文章

液相色譜法檢測孕酮體外釋藥量

閱讀：23發(fā)布時間：2022-9-12

  孕酮釋放出來的天然孕酮經(jīng)過陰道黏膜直接吸收作用于人體, 沒有首過效應(yīng), 在乳汁里只有微量分布, 不影響嬰兒身體發(fā)育, 故適用于哺乳期。且孕酮還可治療黃體不足、子宮內(nèi)膜面有很好的應(yīng)用前景。

  應(yīng)用氣相色譜法來檢測孕酮的體外釋藥量的研究雖已見報道，但在分析領(lǐng)域, 氣相色譜儀的普及率遠沒有液相色譜儀和紫外分光光度計的普及率高。

  HPLC法：量取1 000 ml超純水于1 000 ml溶出杯中, 將含2 g孕酮的孕酮和空白硅橡膠分別用細尼龍繩固定在溶出儀的攪拌槳上, 水浴溫度37.0±0.5℃, 以50 r/min的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn), 每24 h更換介質(zhì)溶液。d 7分別取10 µl空白及孕酮的體外釋放液注入液相色譜儀, 在相同測試條件下, 記錄色譜圖。

  系統(tǒng)適用性試驗: 用十八烷基鍵合硅膠為填充劑, 以甲醇:水(63:37)為流動相, 流速為1.0 ml/min,檢測波長254 nm，理論塔板數(shù)按孕酮峰計算應(yīng)不低于1000。

  孕酮對照品溶液制備: 精密稱定孕酮對照品10 mg, 置10 ml量瓶中, 用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取該對照品溶液1 ml，置100 ml量瓶中，用超純水稀釋至刻度，搖勻待用。

  分別精密量取孕酮對照品溶液和孕酮體外釋放液各10 µl，注入液相色譜儀，按外標法以峰面積計算體外釋放液中孕酮的含量。


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