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技術(shù)文章

液相色譜法測定紫花苜蓿青貯中的有機(jī)酸

閱讀:14發(fā)布時間:2022-9-11

  液相色譜法測定紫花苜蓿青貯中的有機(jī)酸

  紫花苜蓿是豆科苜蓿屬多年生草本植物,可以加工成苜蓿草粉,作為家畜配合飼料的主要原料使用,起平衡日糧氨基酸、提供豐富的維生素的作用,并提供纖維素。紫花苜蓿莖葉中含有豐富的蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)、及胡蘿卜素,特別是葉片中含量更高。

  苜蓿青貯或半干青貯,養(yǎng)分損失小,包括半干青貯,加甲酸青貯,拉伸膜青貯等三種技術(shù)紫花苜蓿(Medicago sativa)青貯之后,原料中的可溶性糖等在植物酶或微生物作用下,部分轉(zhuǎn)化為乳酸、乙酸、丙酸、丁酸等有機(jī)酸,青貯飼料的PH下降,抑制有害微生物的繁衍。

  乳酸的測定有蒸餾法、液相色譜法、酶法等,乙酸、丙酸、丁酸等揮發(fā)性脂肪酸的測定常用氣相色譜法。本方案采用極性較強(qiáng)的離子交換色譜柱,用液相色譜儀對紫花苜蓿青貯飼料的浸提液進(jìn)行有機(jī)酸測定,探討了用液相色譜儀一次性測定乳酸和揮發(fā)性脂肪酸方法的可行性與準(zhǔn)確度。

  本方法樣品處理過程簡單,分離效果理想,相對標(biāo)準(zhǔn)差低,回收率好,具有良好的重現(xiàn)性和精密度,同時測定紫花苜蓿青貯浸提液中的乳酸、乙酸、丙酸、丁酸,約20min即可分離*,所以用HPLC測定紫花苜蓿青貯飼料中有機(jī)酸更為簡單、方便、快捷。

  儀器

  LC600B等度液相色譜儀(南京科捷分析儀器有限公司),包括LC600B高壓恒流泵1臺、SPD600B紫外檢測器1臺、SCL600B系統(tǒng)控制器1臺、8725i手動進(jìn)樣閥1只、反控色譜工作站1 套(內(nèi)置反控主機(jī))、液相色譜柱1根等。

  樣品處理

  準(zhǔn)確稱取20g紫花苜蓿青貯,加入200mL蒸餾水,均質(zhì)1min,4層紗布過濾,濾液用試紙精濾,再用0.45μm濾膜過濾,浸提液待測。

  色譜條件

  色譜柱:Shodex KC-811色譜柱300mm×8mm

  流動相:3mM高氯酸

  柱溫:50℃

  檢測波長:210nm

  流速:1mL/min

  進(jìn)樣量:5μL

  色譜圖:液相色譜法測定紫花苜蓿青貯中的有機(jī)酸

  1 乳酸;2 乙酸;3 丙酸;4 丁酸


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