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南京科捷分析儀器有限公司
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閱讀:43發(fā)布時(shí)間:2022-9-8
離子色譜儀檢測嬰幼兒奶粉中營養(yǎng)強(qiáng)化劑低聚半乳糖的含量
低聚半乳糖是一種具有天然屬性的功能性低聚糖,在自然界中,動物的乳汁中存在微量的GOS,而人母乳中含量較多,低聚半乳糖是人體腸道中雙歧桿菌、嗜酸乳酸桿菌等有益菌的營養(yǎng)源和有效的增殖因子,可以改善人體腸道的消化吸收功能。
新生兒的消化功能比較薄弱,嬰兒體內(nèi)的雙歧桿菌菌群的建立很大程度上依賴母乳中的GOS成分。所以嬰幼兒奶粉中都添加了低聚半乳糖的營養(yǎng)成分。中華人民共和國衛(wèi)生部2008年第20號公告批準(zhǔn)低聚半乳糖為新資源食品,并規(guī)定了相應(yīng)的使用標(biāo)準(zhǔn)。
南京科捷用磷酸鹽緩沖液提取試樣中游離的低聚半乳糖和乳糖,采用半乳糖苷酶將提取液中低聚半乳糖的乳糖酶解,將提取的初始溶液和酶處理過的溶液分別用于離子色譜儀測定。
*步測定初始溶液中游離的半乳糖和乳糖,第二步測定從低聚半乳糖和乳糖中釋放出的半乳糖總量。利用乳糖和半乳糖的含量計(jì)算試樣中低聚半乳糖的含量。
實(shí)驗(yàn)儀器
離子色譜儀IC-600(南京科捷分析儀器有限公司)采用了全塑料流路設(shè)計(jì),泵頭,流路等使用PEEK制造,能使用強(qiáng)酸,強(qiáng)堿的淋洗液,可跟的有機(jī)溶劑兼容,方便用戶對復(fù)雜樣品進(jìn)行檢測后進(jìn)行沖洗和維護(hù)。設(shè)計(jì)緊湊,合理,特大LCD液晶顯示屏,具有常規(guī)檢測和高精檢測兩種檢測模式,*的數(shù)字式控溫電導(dǎo)檢測器。
酶解試樣前處理
1、吸取制備的試樣液10mL,移入100mL容量瓶中,標(biāo)記為A1,吸取1mLβ-半乳糖苷酶溶液,放入A1中,用鋁箔紙密閉搖勻;同時(shí)做酶試劑空白A0。
2、將含有活性酶A1和A0的兩個(gè)100mL容量瓶在(60±2)℃水浴中持續(xù)溫和振搖60min(從混合物溫度達(dá)到60℃開始計(jì)算時(shí)間,振搖過程中避免形成水沫或空氣泡沫),然后將A0和A1兩個(gè)處理溶液,用冰浴冷卻至室溫,向A1,A0兩個(gè)100mL容量瓶中各加入20%乙腈溶液5mL,用水定容,混勻。
3、分別取適量上述處理后溶液至離心管中,10000r/min離心10min,上層水相用0.2μm濾膜過濾,用離子色譜儀測定。
色譜參考條件
色譜柱 | PA20陰離子交換色譜柱(150mm×3mm,顆粒3.5μm), 保護(hù)柱(30mm×3mm)或等效色譜柱 |
柱溫 | 30℃ |
流動相流速 | 0.4mL/min |
進(jìn)樣量 | 20μL |
檢測器 | 脈沖安培檢測器 |
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