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分光光度計分析檢測家蠶絡氨酸羥化酶的活性

閱讀:31發(fā)布時間:2022-8-29

分光光度計分析檢測家蠶絡氨酸羥化酶的活性

 

    絡氨酸羥化在多巴胺的合成體系中限速步驟,氧化絡氨酸為,并進一步氧化為多巴胺。目前檢測絡氨酸羥化酶活性的分析方法很多,包括放射性同位素化學法、液相色譜法分析L-dopa的生成、二氧化碳碳十四的捕獲。這些檢測絡氨酸羥化酶活性的方法都是可行的選擇,但是這些檢測方法具有相當大的缺點。首先,這些方法是耗時的,例如液相色譜法分析需要平均每20min采1次樣,導致試驗和數(shù)據(jù)分析之間相當大的時間間隔。其次,常見絡氨酸羥化酶活性的檢測方法為放射性標記法,這些放射性的物質需要隔離,需要購買昂貴的化學藥品,并且涉及特殊的處理。如氚釋放實驗要求廣泛地繁瑣后期監(jiān)測工作,從反應混合物中分離氚化水;而另一種方法必須捕獲二氧化碳碳十四,并且檢測碳十四。這2種檢測方法都是耗時而緩慢的,并涉及液體閃爍計數(shù)。其次,這些方法中測定每一個產物的形成發(fā)生在固定的時間點,不能實時監(jiān)測絡氨酸羥化酶活性。本研究采用基因重組家蠶絡氨酸羥化酶開發(fā)一種新的是是檢測方法,通過分光光度法監(jiān)測產生的L-dopa用以測量BmTH活性,用高碘酸鈉氧化L-dopa產生多巴色素,其在475nm處有峰值。該方法簡潔、靈敏、迅速,且對身體沒有輻射,方便推廣使用,并可用于體內、體外TH活性的檢測。

儀器準備

UV1700系列 紫外可見分光光度計

UV1700PC UV Visible Spectrophotometer

簡介 : 本產品采用全新設計的比例監(jiān)測雙光束學系統(tǒng),具有優(yōu)良的光學性能,使用方便,是實驗室分析*的基本儀器之一。

應用領域: 各種涉及水和廢水分析領域的通用儀器,應用范圍包括市政和工業(yè)廢水、飲用水、加工過程用水、地表水、冷卻水和鍋爐補給水等。

 

測定結果


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