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技術(shù)文章

瘋牛病PrioSTRIP試紙條檢測(cè)法

閱讀：558發(fā)布時(shí)間：2011-7-6

本方法（Prionics-check PrioSTRIP）由瑞士PrionicsAG公司開發(fā)研制，是一種快速簡單的試紙條式免疫色譜檢測(cè)方法，2004年通過歐盟認(rèn)證。該方法的原理是制備腦組織勻漿，用蛋白酶K處理，然后與標(biāo)記有PrP單克隆抗體的乳膠顆粒孵育，zui后用試紙條直接檢測(cè)孵育后的溶液。根據(jù)試紙條上出現(xiàn)的顏色條帶來判定實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

本方法的敏感性和特異性均為100％，整個(gè)反應(yīng)在3h內(nèi)可以完成。

瘋牛病PrioSTRIP試紙條檢測(cè)法的主要步驟如下。

（1）樣品準(zhǔn)備 取腦閂部組織，勻漿，然后將勻漿液加入到96孔分析板中。

（2）消化 往分析板中加入PK酶消化液，使正常的PrP蛋白質(zhì)*消化掉，而瘋牛病病原則保留下來。

（3）孵育 將消化完的樣品轉(zhuǎn)移到檢測(cè)板，加入PrP抗體，該抗體結(jié)合有藍(lán)色乳膠顆粒。

（4）檢測(cè) 將梳形試紙條插入檢測(cè)板中的液體里，待20min。

（5）分析結(jié)果 在陽性對(duì)照出現(xiàn)正常結(jié)果的情況下，如果試紙條出現(xiàn)一個(gè)條帶，則該樣品為瘋牛病陰性，如果出現(xiàn)兩個(gè)條帶則該樣品為BSE陽性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果也可用的儀器讀數(shù)并分析。

 


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