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技術(shù)文章

新城疫實驗室診斷

閱讀:563發(fā)布時間:2011-3-12

對于該病的實驗室診斷,傳統(tǒng)的方法是進行病毒分離,然后用血凝和血凝抑制進行鑒定。盡管NDV只有一種血清型,但是不同毒株間的毒力差異很大。加上近年來新城疫弱毒活疫苗的廣泛應(yīng)用,僅從具有臨床癥狀的病禽分離出病毒進行鑒定,還不能對ND作出確診,因此需要對分離株的致病性進行評估,OIE根據(jù)*的病原毒力與病原分子結(jié)構(gòu)間的關(guān)系建立的體外毒力鑒定技術(shù),已經(jīng)用于世界范圍內(nèi)新城疫病毒的調(diào)查。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)對報告ND暴發(fā)作丁下述定義:ND是由血清1型禽副黏病毒(APMV-1)引起的禽類感染,該APMV—1在毒力上符合下列兩個標(biāo)準(zhǔn)中的一個:

①該病毒在1日齡雛雞的腦內(nèi)接種致病指數(shù)(1CPl)大于0.7;
②該病毒P1蛋白的N端(即117位殘基)為苯*(F),而F2蛋白的C端有多個堿性氨基酸(直接測序或從核苷酸序列推導(dǎo))。所謂多個堿性氨基酸是指在113位和116位之間至少有3個*或賴氨酸殘基。不能顯示上述氨基酸殘基的特征結(jié)構(gòu)則需要對分離的病毒作ICPl試驗。

根據(jù)OIE對NDV的這一定義,目前OIE確診ND有兩種方法:
一是分離鑒定NDV并進行生物學(xué)試驗,測定分離NDV的MDT、ICPt和IVPI以確定其毒力;
二是采用基于RT-PCR的分子生物學(xué)方法,確定病原為NDV并確定其毒力。

因常規(guī)的病毒分離鑒定和用生物學(xué)試驗確定毒力費時、費力、費錢,又要使用動物,已越來越不被人們所接受。在這種情況下,經(jīng)過幾年探索而日趨成熟的分子確診方法,可以用來取代常規(guī)的確診方法。近年來,隨著分子生物學(xué)和免疫學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展,越來越多的快速診斷方法在新城疫的檢測方面得到廣泛的應(yīng)用,如RT-PCR技術(shù)、熒光RT-PCR技術(shù)、EIASA技術(shù)和膠體金標(biāo)記的診斷技術(shù)等。
 


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