ELISA是目前應(yīng)用zui廣泛的一種免疫學(xué)測(cè)定方法。它是以物理方法將抗體或抗原吸附在固相載體上進(jìn)行的免疫酶測(cè)定試驗(yàn)。·ELlSA檢測(cè)NDV抗原是研究zui多進(jìn)展zui快的技術(shù)，各種EL／SA在NDV抗原檢測(cè)及抗體測(cè)中得到廣泛應(yīng)用?？导俗蔚扔肊LISA抗原試劑盒對(duì)經(jīng)NDVF48E8強(qiáng)毒株攻擊后發(fā)病致死雞的內(nèi)臟樣品、泄殖腔棉拭和自然發(fā)病雞的口腔、泄殖腔、嗦囊棉拭進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果表明該試劑盒快速特異，并可同時(shí)檢出大量樣品。
P．Ramadass等用山羊抗兔辣根過(guò)氧化物酶結(jié)合物以Dot-ELISA法對(duì)禽糞便和組織懸液樣品進(jìn)行NDV的檢側(cè)，僅需30rain就能完成試驗(yàn)，并且其靈敏度與間接熒光抗體試驗(yàn)相似。
曹殿軍等用辣根過(guò)氧化銜酶
于圣青等從10株抗雞NDV特異性單克隆抗體中篩選出2株，分別用作包被抗體和酶標(biāo)抗體而建立的McAbs—夾心ELISA試驗(yàn)，對(duì)提純NDV的zui小檢出量為25ng／ml病毒蛋白，并從臨床疑似ND的724只病雞的口腔棉拭樣品中共檢出陽(yáng)性502只，其中800個(gè)樣品與病毒分離試驗(yàn)結(jié)果*一致。
盧建紅等以抗NDV單抗夾心ELISA試驗(yàn)為基礎(chǔ)，建立了PEG-ELISA法，并用于臨床診斷樣品NDV的檢測(cè)，結(jié)果·PEG—ELISA法的檢出率比McAbs夾心ELISA法提高了3％。
吳紅專等用HRP標(biāo)記F23單抗制備的單抗ELISA試劑盒，在華東地區(qū)部分雞場(chǎng)進(jìn)行NDV強(qiáng)毒感染的監(jiān)測(cè)結(jié)果表明該試劑盒的監(jiān)測(cè)結(jié)果與病毒分離的陽(yáng)性符合率為100％，陰性符合率為96．7％。
高云英等用過(guò)碘酸鈉法標(biāo)記辣根過(guò)氧化物酶與單克隆抗體制備結(jié)合物對(duì)NDV強(qiáng)毒感染瀕死雞的5種組織臟器以雙抗夾心ELISA法進(jìn)行NDV抗原檢測(cè)，檢出率均在80％以上，與直接熒光抗體試驗(yàn)比較，對(duì)人工感染病例的檢出符合率為100％，且具有敏感性高、特異性強(qiáng)、快速簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。
另外ELISA法也用于ND抗體的監(jiān)測(cè)，姜平等應(yīng)用dot—ELISA檢測(cè)ND血清，并與常規(guī)ELISA、HI法相比較，結(jié)果表明，該法用于ND抗體檢測(cè)，其特異性和敏感性均優(yōu)于常規(guī)ELlSA和HI，且克服了常規(guī)ELISA設(shè)備要求昂貴和HI敏感性低等缺點(diǎn)。
ELISA法雖然存在著試劑純度和酶結(jié)合物的特異性、結(jié)果陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)的確定等問(wèn)題有待解決，但由上述可見(jiàn)，其與單克隆抗體相結(jié)合并標(biāo)準(zhǔn)化、試劑盒化，已成為臨床上ND診斷和監(jiān)測(cè)的一個(gè)重要發(fā)展方向。
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