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弓形蟲病診斷免疫學(xué)方法

閱讀:714發(fā)布時間:2011-2-26

免疫學(xué)方法是目前該病的常用重要實(shí)驗(yàn)診斷方法。如方法應(yīng)用得當(dāng),結(jié)果判斷準(zhǔn)確,能達(dá)到較好的輔助診斷目的。急性期以檢出特異性IgM抗體或循環(huán)抗原為可靠指標(biāo),也可觀察特異性IgG抗體的動態(tài)變化,慢性期則以檢測IgG抗體為主。弓形蟲病的血清學(xué)診斷方法有間接血凝試驗(yàn)、間接熒光抗體試驗(yàn)、染料試驗(yàn)、皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)和瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)等。染色試驗(yàn)是敏感可靠的方法,主要用于早期診斷。間接血凝試驗(yàn)用做流行病學(xué)調(diào)查。變態(tài)反應(yīng)多用于人的檢查和獸醫(yī)檢查豬。國內(nèi)應(yīng)用較為廣泛的是間接血凝試驗(yàn)。

染色試驗(yàn)(DT) 為弓形蟲病經(jīng)典而*的血清學(xué)診斷方法。其原理為;在含有輔助因子(補(bǔ)體)的新鮮血清參與下,待測血清中特異性抗體使蟲體細(xì)胞變性而不為美藍(lán)著色。鏡檢見半數(shù)以上蟲體不著色者為陽性,半數(shù)以上蟲體著色者為陰性。該法必須用活速殖子為抗原,含輔助因子的正常血清須經(jīng)篩選獲得,由于篩選輔助因子較困難而使應(yīng)用受到一定限制。呂元聰?shù)龋?994)以弓形蟲碎片為抗原,建立的免疫酶染色試驗(yàn)(1EST)與DT的檢測結(jié)果在已知和未知血清標(biāo)本中差異無顯著性(P>0.05)。該法操作簡便,不需特殊設(shè)備,便于基層推廣應(yīng)用。Dando等(2001)用表達(dá)p:—半乳糖苷酶的轉(zhuǎn)基因弓形蟲速殖子的補(bǔ)體介導(dǎo)的溶解試驗(yàn)檢測患者血清的弓形蟲特異性抗體,比Sabin-Feldman染色試驗(yàn)簡便、有效。

皮下試驗(yàn)(1CT) Netrebko(2003)用ICT檢測了5472例確診為弓形蟲病患者的免疫力,陽性率54.28%,認(rèn)為ICT方法簡便、經(jīng)濟(jì)。

間接血凝試驗(yàn)(1HA) 由于該法簡便、快速,具有良好的特異性與敏感性,加之商品試劑易獲得,故被廣泛使用。本法所測抗體在感染后出現(xiàn)較晚,較適宜用于隱性感染及血清流行病學(xué)調(diào)查。但該法重復(fù)性欠佳,偶因非特異性凝集出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。

間接熒光抗體試驗(yàn)(1FA) 以熒光標(biāo)記第二抗體,用完整的速殖子作抗原,檢測待檢血清中的IgM或IgG抗體。此法具有高度的特異性、敏感性與穩(wěn)定性,簡便快速:由于所測抗體多為蟲體表膜抗原誘導(dǎo)的特異性抗體,因此具有早期診斷價值。血清中有類風(fēng)濕因子或抗核抗體時可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。

 


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