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免疫放射分析IRMA與放射免疫分析RIA的異同點(diǎn)

閱讀：6201發(fā)布時(shí)間：2011-1-15

1．標(biāo)記物在RIA中為核素標(biāo)記抗原，在IRMA中為核素標(biāo)記抗體。抗原有不同種類(lèi)，根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)，標(biāo)記時(shí)需用不同的核素和不同的方法?？贵w為蛋白質(zhì)，有利于碘化標(biāo)記，不同抗體標(biāo)記方法基本相同。標(biāo)記抗體的比活度高，提高了分析的靈敏度。

2．反應(yīng)速率、反應(yīng)速度與反應(yīng)物的濃度成正比，在IRMA中標(biāo)記抗體是過(guò)量的，而且不存在競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合的復(fù)雜反應(yīng)，所以反應(yīng)速度較RIA快。在RIA中抗體量是微量的，所以一定要用高親和力的多克隆抗體，而在IRMA中應(yīng)用親和力較低的單克隆抗體也能得到滿(mǎn)意的結(jié)果。

3．反應(yīng)模式RIA為競(jìng)爭(zhēng)抑制，測(cè)得放射性的量與受檢抗原成反比。IRMA為非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，劑量與反應(yīng)曲線(xiàn)為正相關(guān)的直線(xiàn)關(guān)系。

4．特異性在單位點(diǎn)IRMA中，一般均應(yīng)用針對(duì)不同位點(diǎn)的單克隆抗體，其交叉反應(yīng)率低于應(yīng)用多克隆抗體的RIA。

5．標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的工作濃度通常RIA的工作范圍為2—3個(gè)數(shù)量級(jí)，而IRMA可達(dá)3個(gè)數(shù)量級(jí)以上。

6．分析誤差RIA中加入的抗體和標(biāo)記抗原都是定量的，加樣品誤差可嚴(yán)重影響測(cè)定結(jié)果。IRMA中標(biāo)記和固相抗體在反應(yīng)中都是過(guò)量的，只有受檢標(biāo)本的加樣誤差才會(huì)影響分析結(jié)果。因此，IRMA的批內(nèi)和批間變異均比較小。

7．其他RIA可以測(cè)定大分子量與小分子量的物質(zhì)，雙位點(diǎn)IRMA只能測(cè)定在分子上具有2個(gè)以上抗原表位的物質(zhì)。

在RIA中應(yīng)用的多為多克隆抗體，親和力和特異性要求較高，但用量很少。IRMA中標(biāo)記抗體和固相抗體用量較多，一般均用來(lái)源豐富、特異性較高的單克隆抗體。


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