熒光偏振免疫分析法（fluorescence polarization immunoassay，F(xiàn)PIA）是一種定量免疫分析技術，其基本原理是熒光物質(zhì)經(jīng)單一平面的藍偏振光（485nm）照射后，吸收光能躍入激發(fā)態(tài)，隨后回復至基態(tài)，并發(fā)出單一平面的偏振熒光（525nm）。偏振熒光的強弱程度與熒光分子的大小呈正相關，與其（受激發(fā)時）轉(zhuǎn)動的速度呈反相關。FPIAzui適宜檢測小至中等分子物質(zhì)，常用于藥物、激素的測定。
FPIA采用競爭反應的原理，在缺乏未標記分析物（通常是待測樣品）時熒光信號zui強；加入末標記分析物后，在已標記和未標記樣品之間的競爭將減弱熒光信號。熒光信號強度與游離的分析物的濃度成正比，與待測樣品中未標記分析物的濃度成反比。通過測定一系列已知濃度的標準晶，繪制競爭結合抑制標準曲線。經(jīng)與標準反應曲線比較而得到定量值。以測定半抗原藥物的濃度為例，反應系統(tǒng)內(nèi)除待測藥物外，同時加入一定量用熒光物質(zhì)標記的相應藥物（小分子），二者與有*的特異性抗體（大分子）競爭結合。當待測藥物濃度高時，經(jīng)過競爭，與大部分抗體結合，而標記藥物則呈游離的小分子狀態(tài)，因此在液相中轉(zhuǎn)動速度較快，測得的偏振熒光強度也較低。反之，待測藥物濃度低時，大部分標記藥物與抗體結合，形成大分子的標記抗原抗體復合物，在液相中轉(zhuǎn)動速度較慢，此時檢測到的偏振熒光強度也較高。測定反應系統(tǒng)的偏振光大小，從標準曲線上就可地得知樣品中待測藥物的相應含量。
FPIA法的優(yōu)點是靈敏度高，例如測定Digoxin的靈敏度可達0．2ng／m1，精密度高、速度快、操作簡便，樣品用量少，儀器不需要每日校準。缺點是儀器設備昂貴，藥品試劑盒專屬性強，需進口。
