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人需要消化，細(xì)胞也是需要消化的，那細(xì)胞消化的方法你知道幾種？和小編一起來(lái)看看吧！
一、離子螯合劑：不破壞細(xì)胞表面分子，僅與CAMs螯合，因此，如果檢測(cè)細(xì)胞表面分子的話，盡量，甚至是一定不要用酶消化法。
1、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。
2、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。
二、物理法：直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。
三、冷凍法：
此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理，是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。
優(yōu)點(diǎn)：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。
具體過(guò)程是：
1.用較多的4度的PBS洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例，加1.5ml/孔)。
2.再加0.5ml 4度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落。
3.輕輕吹打，細(xì)胞即*脫落。
4.按一定比例傳代。
四、酶消化法。
1、胰酶。這是用得zui多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在37度條件下，一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含鈣、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-20度。
2、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。
上海勁馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司感謝多年以來(lái)各位老師對(duì)本公司的大力支持，希望通過(guò)我們的不懈努力能為科研事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)！公司為您提供實(shí)驗(yàn)室操作試劑包括elisa試劑盒,胎牛血清,培養(yǎng)基,對(duì)照品,抗體,標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑等。
