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流式胞內(nèi)染色步驟
（使用FIX & PERM固定破膜）
制備好細(xì)胞懸液，取100ul
（全血樣本：人100ul，小鼠30~50ul）
染表面抗體，室溫避光孵育15min，不用洗滌
↓
加入FIX&PERM Reagent A 100ul室溫孵育15min
↓
加入3ml流式染色緩沖液（Flow Cytometry Staining Buffer）
300g 離心5min 棄上清收集細(xì)胞
液體盡量倒干凈，不要殘留
↓
渦旋混勻沉淀，加入FIX&PERM Reagent B
100ul和胞內(nèi)抗體
（同型對照管加入同等劑量的抗體）
混勻，室溫避光孵育20min
↓
加入3ml流式染色緩沖液，300g離心5min棄上清收集細(xì)胞
↓
用0.5ml 流式染色緩沖液重懸后立即上機。
或者加入0.5ml 0.1~4%多聚甲醛避光4℃保存24小時內(nèi)上機分析
