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ELISA試劑盒靈敏度低造成原因詳解

2019-4-17  閱讀(2452)

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    上海勁馬致力于提供生命科學領域的技術(shù)服務,提供實驗技術(shù)服務,為廣大科研工作者大大節(jié)省了重復勞動的時間和精力,我們有過硬的技術(shù)咨詢和完善的售后服務,購買ELISA試劑盒贈送免費代測服務,在線一對一技術(shù)指導,為您解決后顧之憂。

    近日,有客戶在做完實驗后,反映陽性對照、質(zhì)控在內(nèi)的所有板孔顏色均較淡。這是什么原因造成的?我司技術(shù)整理后給出如下解析,邀您來看看!

    容易造成的原因:

    1.試劑盒必須在有效期內(nèi)使用, 超過有效期的產(chǎn)品可能會產(chǎn)生很弱的信號;

    2.試劑盒沒有按規(guī)定進行保存,受高溫影響;

    3.試劑、樣品用前未平衡至室溫;

    4.加入試劑的體積和時間有誤,移液器計量不準,吸嘴內(nèi)水分太多或不清潔;

    5.洗板及加樣過程中,酶標受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力;

    6.孵育時間及孵育溫度未達到要求 ,反應板放入培養(yǎng)箱時注意溫度并及時調(diào)整;

    7.洗板次數(shù)過多,或濃縮洗液稀釋倍數(shù)不符合要求;洗滌沖擊力太大。浸泡時間太長;

    8.顯色劑加量不足或順序顛倒,或混合后加入;

    9.底物作用時間不夠;

    10.蒸餾水水質(zhì)有問題。

 

    解決辦法:

    1.實驗前檢查試劑的組分及批號,確認試劑未過期;

    2.不要將試劑盒長時間置于常溫下,按使用規(guī)定儲藏;

    3.確定所使用的試劑體積正確,加入時間適當;

    4.校正移液器,移液器與吸嘴配合要緊密吻合。移液不宜太快,排放應*;

    5.確認盛酶標的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認配制洗液的容器已洗干凈,確認配制洗液的純化水達到要求且未受污染;

    6.孵育溫度應控制在 37-38℃,孵育時間嚴格按照說明書操作。保溫期內(nèi)不宜多開門,以免影響保溫;

    7.嚴格按說明書要求稀釋濃縮洗液及洗板,減小洗滌沖擊力,按說明書要求置留洗滌液時間和洗滌次數(shù);

    8.顯色劑滴瓶垂直向下,持力均勻,滴速不宜過快,先加顯色劑 A,后加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入;

    9.準確定時;

    10.測定蒸餾水配制試劑對酶免疫法的影響。

    勁馬以誠信為本,努力打造的品牌,為您提供的售中、售前、售后服務,具有的技術(shù)團隊,把上的產(chǎn)品引入國內(nèi)市場,滿足國內(nèi)廣大客戶的需求,在二十一世紀生命科學蓬勃發(fā)展的時代,將緊跟生命科學的發(fā)展動態(tài),為廣大科研學者探索生命的奧秘而奉獻綿薄之力!

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