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開(kāi)學(xué)*課:ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前如何做好優(yōu)化?

2017-9-1  閱讀(2139)

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   九月的天空很美很藍(lán),在藍(lán)的有些過(guò)分的天空下就迎來(lái)了開(kāi)學(xué)日,今天對(duì)于我們來(lái)說(shuō)是九月*個(gè)工作日,對(duì)于祖國(guó)的花朵們來(lái)說(shuō)確是一個(gè)令人充滿(mǎn)期待及興奮的日子。今天上海勁馬分享開(kāi)學(xué)*課:ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前如何做好優(yōu)化?


ELISA檢測(cè)試劑盒包被條件的優(yōu)化:
1、包被液的挑選:通常常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,假如包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話(huà),也可以運(yùn)用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。
2、包被濃度的挑選:包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)改變,通常蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml,要清晰對(duì)于特定包被抗原的zui適包被濃度需求通過(guò)試驗(yàn)來(lái)斷定。
3、包被溫度的挑選:通常是4-8度條件下放置一個(gè)黑夜或者37度保溫2小時(shí),咱們強(qiáng)烈建議4-8度條件下包被,有利于蛋白活性的堅(jiān)持。
4、包被抗原的挑選:可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類(lèi)。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機(jī)化合物,因?yàn)榉肿恿刻?,通常難于直接吸附在酶標(biāo)板上,通常都先使其與無(wú)關(guān)蛋白質(zhì),比如BSA等偶聯(lián),偶聯(lián)物吸附于固相載體上。


ELISA檢測(cè)試劑盒加樣的優(yōu)化:
    在這一進(jìn)程中,通常狀況下有三次加樣,它們分別是加標(biāo)本,加酶物,加底物。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)部分濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振動(dòng)。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、縮短后即可獲得。也可在板孔中參加稀釋液,再在其參加血清標(biāo)本,然后在微型震動(dòng)器上震動(dòng)1分鐘以保證混和。通常說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超越一星期測(cè)定的需低溫冰存。


 耳聞不如目見(jiàn),目見(jiàn)不如足踐,在您收到了認(rèn)真挑選本公司ELISA試劑盒之后,就需要準(zhǔn)備著實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題了,科研伙伴們?nèi)羰怯龅搅艘恍┘夹g(shù)性(比如實(shí)驗(yàn)步驟、注意問(wèn)題、計(jì)算、報(bào)告等等)的問(wèn)題,都可以上海勁馬業(yè)務(wù)員,我們將會(huì)在*時(shí)間為您安排技術(shù)人員解答疑惑。

                            

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