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western和ELISA處理樣本有何差別?

2015-5-18  閱讀(2038)

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western 和ELISA 處理樣本有何差別?

根據(jù)上海勁馬生物實(shí)驗(yàn)分析,將western和Elisa處理樣本卻別比對(duì)出來(lái),分析給客戶(hù)。歡迎閱讀參考!

Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制劑),然后冰上研磨,收集于EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm離心15min,取上清分裝,即得到蛋白樣品。建議直接電泳,多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量,一次性用完一支,避免反復(fù)凍融。

ELISA樣品,直接腦組織冰上勻漿,收集于EP管,同上一樣離心,大約220-250ul每支分裝(因?yàn)镋LISA上樣量基本都是每孔100ul,做復(fù)孔,每個(gè)樣品2孔,就需要200ul,為了避免不夠2孔,分裝時(shí)要大于200ul每支),直接實(shí)驗(yàn)。多余的-80保存,一樣避免反復(fù)凍融。

不過(guò)ELISA少量樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),或者查閱文獻(xiàn),看看大概組織里有多高濃度,選擇合適的試劑盒,測(cè)量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過(guò)高測(cè)量不準(zhǔn),或者濃度過(guò)低,小于試劑盒zui低可測(cè)濃度。

上海勁馬生物提醒廣大客戶(hù)群體:買(mǎi)Elisa試劑盒時(shí),盡量先查文獻(xiàn),通過(guò)文獻(xiàn)找品牌,再找供應(yīng)商,找供應(yīng)商就找正規(guī)代理商,千萬(wàn)不要去干“賠夫人又折兵"的蠢事。

截止2015年2月底,引用上海勁馬生物ELISA試劑盒的SCI文章總數(shù)突破1030篇,并且還在以15篇/月的速度遞增,有的更是發(fā)表在<Nature>,<PNAS>,<Diabetes>,<Immunity>,<PlosOne>等*期刊上。




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