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Elisa試劑盒具體操作方法表格版發(fā)布

2015-2-5  閱讀(1870)

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Elisa試劑盒具體操作方法表格版發(fā)布

 根據(jù)上海勁馬生物多年來Elisa試劑盒的操作經(jīng)驗(yàn),我司特在新春佳節(jié)來臨之際,對(duì)Elisa試劑盒操作步驟建立表格版文檔,供大家詳細(xì)參考Elisa試劑盒的具體操作步驟。咨詢我司試劑產(chǎn)品,年末有特惠活動(dòng)哦。

方法

步驟

間接法(測(cè)抗體)

雙抗體夾心法

(測(cè)抗原)

競(jìng)爭(zhēng)法(測(cè)抗原)

抑制性測(cè)定法

1

包被抗原:用包被緩沖液稀釋抗原至zui適濃度(5~20μg/ml)各0.3ml加于微反應(yīng)板每個(gè)凹孔中,4℃過夜或37℃水浴2~3小時(shí),貯存冰箱

包被抗體:用包被緩沖液稀釋特異性抗體球蛋白至zui適濃度(1~10μg /ml),每凹孔加0.3ml,4℃過夜,或37℃水浴3小時(shí),貯存冰箱

包被特異性抗體:

 

同左

包被抗原:

 

同左

2

洗滌:移去包被液,凹孔用洗滌緩沖液(含0.05%吐溫-20)洗3次,每次5分鐘

同左

同左

同左

3

加被檢標(biāo)本:每凹孔加入用含有0.05%吐溫-20的稀釋緩沖液稀釋的被檢血清各0.2ml,37℃,作用1~2小時(shí)

每凹孔加入0.2ml用稀釋緩沖液稀釋的含抗原的被檢標(biāo)本,37℃作用1~2小時(shí)。

分2組,a組加酶標(biāo)記抗原和被檢抗原混合液0.2ml,另一組只加酶標(biāo)記抗原液0.2ml,37℃作用1~2小時(shí)。(混合液可作成不同稀釋度)。

a組加參考抗體和被檢抗原混合液0.2ml,另一組加參考抗體與等量稀釋劑0.2ml,37℃作用1~2小時(shí)。

4

洗滌:重復(fù)2

同左

洗滌:同左

洗滌

5

加入酶結(jié)合物:每凹孔加入稀釋緩沖液稀釋的酶結(jié)合物0.2ml 37℃作用1~2小時(shí)

加入0.2ml用稀釋緩沖液稀釋的酶標(biāo)記特異性抗體溶液,37℃作用1~2小時(shí)或由預(yù)試實(shí)驗(yàn)確定作用時(shí)間。

 

各加入0.2ml抗參考抗體的酶結(jié)合物37℃作用1~2小時(shí)

方法

步驟

間接法(測(cè)抗體)

雙抗體夾心法

(測(cè)抗原)

競(jìng)爭(zhēng)法(測(cè)抗原)

抑制性測(cè)定法

6

洗滌:重復(fù)2

同左

 

洗滌

7

加入0.2ml底物溶液于每個(gè)凹孔,(O.P.D或O.T),室溫作用30分鐘(另作一空白對(duì)照,0.4ml底物加0.1ml終止劑)。

同左

同左

同左

8

加終止劑:每凹孔加2M H2SO4或2M檸檬酸0.05ml。

同左

同左

同左

9

觀察記錄結(jié)果:目測(cè)或用酶標(biāo)比色計(jì)測(cè)定(O.P.D用492nm)O.D值。

同左

用酶標(biāo)比色計(jì)測(cè)定a、b兩組O.D值,并求出a、b、O.D值的差數(shù)

同左

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·優(yōu)勢(shì)一:用途

  1.將酶催化反應(yīng)的放大作用和抗原抗體親和反應(yīng)的高度專一性、特異性相結(jié)合,以酶標(biāo)記的抗原或抗體作為主要試劑進(jìn)行免疫測(cè)試,所以具有很高的靈敏度。

  2.實(shí)現(xiàn)了在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平上對(duì)其進(jìn)行定量。

  3.其抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性。

  4.為濃縮液,配有稀釋液,稀釋后直接可用,無需另行配置

·優(yōu)勢(shì)二:質(zhì)量保證,服務(wù)完善

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