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為何免疫組化染色時必須*抑制內(nèi)源性過氧化物酶的活性，才能降低背景的染色？
在各種組織中都含有很多的內(nèi)源性過氧化物酶，尤其在紅細胞，中性粒細胞，單核細胞嗜酸性細胞，出血的組織壞死的組織等等。含有這種酶的各細胞和組織如果在染色前不對其進行處理和抑制，它們將會在DAB底物的顯色時，與HRP一樣催化底樣，使之顯色，使之與陽性物一樣的黃棕色，造成混亂。為止，在免疫組化染色前，都必須對內(nèi)源性過氧化物酶進行抑制。當然，對它們進行*的消除是不行的，因為抑制太厲害，對抗原也會有相同的抑制作用。氫在抑制內(nèi)源性過氧化物酶時，也要注意對抗原的保護抑制也只能對它們中的大部分在DAB顯色后，顯示出淡黃色，這就足以與真正陽性物的區(qū)別。抑制劑常用的是0.3%的H2O2，也可將其稱為1%H2O2，因為市售的H2O2的濃度為30%，按其凈含量則為0.3%，如果按其溶液的用量則為1%。
關于H2O2的使用，有的使用是單純的H2O2稀釋溶，有的使用是H2O2甲醇混合 物。根據(jù)實驗，認為H2O2甲醇較適合于大多數(shù)的情況，因為除了H2O2外，甲醇對各種酶，都有鈍化的作用，因此H2O2甲醇的雙重作用效果較好。陳尚平等認為在多數(shù)情況中，用甲醇H2O2已經(jīng)獲得令人滿意的結果。
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