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轉(zhuǎn)染方法、原理及應(yīng)用
本文由上海勁馬生物技術(shù)分享，咨詢訂購相關(guān)產(chǎn)品。
DEAE-右旋糖苷法
帶正電的DEAE-右旋糖苷與核酸帶負電的磷酸骨架相互作用形成的復(fù)合物被細胞內(nèi)吞 瞬時性轉(zhuǎn)染 相對簡便、結(jié)果可重復(fù)但對細胞有一定的毒副作用，轉(zhuǎn)染時需除血清。
磷酸鈣法
磷酸鈣DNA復(fù)合物吸附細胞膜被細胞內(nèi)吞 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，瞬時性轉(zhuǎn)染 不適用于原代細胞，操作簡便但重復(fù)性差，有些細胞不適用。
電穿孔法
高脈沖電壓破壞細胞膜電位，DNA通過膜上形成的小孔導(dǎo)入 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，瞬時性轉(zhuǎn)染，所有細胞 適用性廣但細胞致死率高，DNA和細胞用量大，需根據(jù)不同細胞類型優(yōu)化電穿孔實驗條件。
陽離子性的脂質(zhì)體法
帶正電的脂質(zhì)體與核酸帶負電的磷酸基團形成復(fù)合物被細胞內(nèi)吞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。
瞬時性轉(zhuǎn)染，所有細胞 適用性廣，轉(zhuǎn)染效率高，重復(fù)性好但轉(zhuǎn)染時需除血清。
轉(zhuǎn)染效果隨細胞類型變化大
病毒介導(dǎo)法 逆轉(zhuǎn)錄病毒 通過侵染宿主細胞將外源基因整合到染色體中穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，特定宿主細胞 可用于難轉(zhuǎn)染的細胞、原代細胞，體內(nèi)細胞等，但攜帶基因不能太大 細胞需處分裂期，需考慮安全因素 ，腺病毒 瞬時轉(zhuǎn)染，特定宿主細胞 可用于難轉(zhuǎn)染的細胞，需考慮安全因素。
Biolistic 顆粒傳遞法
將DNA用顯微重金屬顆粒沉淀，再將包被好的顆粒用彈道裝置投射入細胞，DNA在胞內(nèi)逐步釋放，表達瞬時性轉(zhuǎn)染 可用于：人的表皮細胞，纖維原細胞，淋巴細胞系以及原代細胞。
顯微注射法
用顯微操作將DNA直接注入靶細胞核 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，瞬時性轉(zhuǎn)染 轉(zhuǎn)染細胞數(shù)有限，多用于工程改造或轉(zhuǎn)基因動物的胚胎細胞。
