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微生物染色方法您知道幾種?

2014-1-15  閱讀(6308)

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實驗中微生物染色方法有很多種,您可以根據(jù)您的實驗需要,選擇適合您的操作方法,下面就讓上海勁馬來為您列舉一些常用方法,一起來看看這些方法您是不是都知道呢?
美藍染色法
1 呂氏堿性美藍染色液美藍 0.3g 95%乙醇 30mL 0.01%氫氧化鉀溶液100mL將美藍溶解于乙醇中,然后與氫氧化鉀溶液混合.
2 染色法將涂片在火焰上固定,待冷.滴加染液,染1~3min,水洗,待干,鏡檢.
3 結(jié)果菌體呈藍色.
革蘭氏染色法
1 結(jié)晶紫染色液結(jié)晶紫 1g 95%乙醇 20mL1%草酸銨水溶液 80mL將結(jié)晶紫溶解于乙醇中,然后與草酸銨溶液混合.
2 革蘭氏碘液碘 1g碘化鉀 2g蒸餾水
300mL將碘與碘化鉀先進行混合,加入蒸餾水少許,充分振搖,待*溶解后,再加蒸餾水至300mL.
3 沙黃復染液沙黃 0.25g 95%乙醇 10mL蒸餾水 90mL將沙黃溶解于乙醇中,然后用蒸餾水稀釋.
染色法
1 將涂片在火焰上固定,滴加結(jié)晶紫染色液,染1min,水洗.
2 滴加革蘭氏碘液,作用1min,水洗.
3 滴加95%乙醇脫色,約30s;或?qū)⒁掖嫉螡M整個涂片,立即傾去,再用乙醇滴滿整個涂片,脫色10s.
4 水洗,滴加復染液,復染1min.水洗,待干,鏡檢.
5 結(jié)果革蘭氏陽性菌呈紫色.革蘭氏陰性菌呈紅色.注:亦可用1:10稀釋石炭酸復紅染色液作復染液,復染時間僅需10s. 
耐酸性染色法(萎-倪二氏法)
1 石炭酸品紅染色液堿性品紅 0.3g 95%乙醇 10mL 5%酚水溶液 90mL將品紅溶解于乙醇中,然后與酚溶液混合.
2 3%鹽酸-乙醇濃鹽酸 3mL 95%乙醇 97mL
3 復染液呂氏堿性美藍染色液.
染色法
1 將涂片在火焰上加熱固定,滴加石炭酸品紅染色液,徐徐加熱至有蒸氣出現(xiàn),但切不可使沸騰.染液如因蒸發(fā)減少時,應隨時添加.染5min,傾去染液,水洗.
2 滴加鹽酸-乙醇脫色,直至無紅色脫落為止(所需時間視涂片厚薄而定,一般為1~3min),水洗.
3 滴加呂氏堿性美藍染色液,復染30s~1min,水洗,待干,鏡檢.
4 結(jié)果:耐酸性細菌呈紅色,其他細菌、細胞等物質(zhì)呈藍色. 
柯氏染色法
1 染色液
1.1 0.5%沙黃液.
1.2 0.5%孔雀綠液.
2 染色法
2.1 將涂片在火焰上固定,滴加0.5%沙黃液,并加熱至出現(xiàn)氣泡,約2~3min,水洗.
2.2 滴加0.5%孔雀綠液,復染40~50s.水洗,待干,鏡檢.
2.3 結(jié)果布氏桿菌呈紅色,其他細菌及細胞呈綠色.
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