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許多科研愛(ài)好者們?cè)谧?strong>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)總會(huì)碰到各種各樣的問(wèn)題，那么為了避免問(wèn)題再次困擾到您的實(shí)驗(yàn)，上海勁馬今天要為您介紹的是：ELISA試劑盒基礎(chǔ)知識(shí)問(wèn)答普及篇。
問(wèn)題：ELISA加樣時(shí)如何防錯(cuò)？
解決方案：
（1）用一張寫(xiě)滿(mǎn)字的紙，字越多越好，比如報(bào)紙，墊在下面，這樣，加過(guò)標(biāo)本的小孔看過(guò)去下面的字會(huì)變小，沒(méi)加的字正常，非常容易區(qū)分。
（2）可以利用液面反光與沒(méi)有加的孔加以區(qū)別
（3）在標(biāo)本加完后，再把加樣槍全壓下，使液面產(chǎn)生小氣泡，可以區(qū)分
問(wèn)題：如何正確使用酶結(jié)合物？
解決方案：
1.酶結(jié)合物的稀釋液
在稀釋液中常加入高濃度的無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)（例如1%BSA或5%脫脂奶粉），通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)抑制酶結(jié)合物在固相載體上的非特異性吸 附。一般還加入能夠抑制蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑，如吐溫20（0.05%的濃度較為適宜）。
2.正確稀釋酶結(jié)合物
酶 結(jié)合物的合適工作濃度需要通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定，濃度過(guò)高易導(dǎo)致本底偏高，濃度過(guò)低則會(huì)導(dǎo)致陽(yáng)性信號(hào)的減弱。
酶結(jié)合物在使用前稀釋?zhuān)♂尯蟮拿?結(jié)合物不宜長(zhǎng)期保存，因?yàn)榈蜐舛鹊拿附Y(jié)合物極易失活。
問(wèn)題：血清如何避免沉淀物的產(chǎn)生？
解決方案：
1、解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法（-2O。C至4。C至室溫），若血清解凍時(shí)改變的溫度太大（如-20。C至37。C），實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
2、解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生
3、請(qǐng)勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。
4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。
5、若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56。C，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。 [5]血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。但不建議以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜。
關(guān)于上海勁馬為您介紹的以上部分解決方案對(duì)您的實(shí)驗(yàn)是否有所幫助呢？如果您的ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)還有其他疑問(wèn)，請(qǐng)登錄我司留言或咨詢(xún)我司在線(xiàn)工作人員，我們將一一為您解答。
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