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1971年瑞典學(xué)者Engvail和Perlmannn,荷蘭學(xué)者Van Weerman和Schuurs分別報(bào)道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測(cè)體液中微量物質(zhì)的固相免疫測(cè)定方法，稱(chēng)為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）。其基本原理與RIA相同。先將已知的抗體或抗原結(jié)合在某種固相裁體上，并保持其免疫活性。測(cè)定時(shí)，將待檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗原或抗體按不同步驟與固相載體表面吸附的抗體或抗原發(fā)生反應(yīng)。用洗滌的方法分離抗原抗體復(fù)合物和游離成分。然后加入酶的作用底物催化顯色，進(jìn)行定性或定量測(cè)定。zui初發(fā)展的免疫酶測(cè)定方法。是使酶與抗體或抗原結(jié)合，用以檢查組織中相應(yīng)的抗原或抗體的存在。后來(lái)發(fā)展為將抗原或抗體吸附于固相載體，在載體上進(jìn)行免疫酶染色，底物顯色后用肉眼或分光光度計(jì)判定結(jié)果。這種技術(shù)就是目前應(yīng)用zui廣的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，俗稱(chēng)ELISA （enzyme linked immunosorbant assay）。
*, 酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可導(dǎo)致大量的催化過(guò)程，所以極為敏感。免疫酶技術(shù)就是將抗原和抗體的免疫反應(yīng)和酶的催化反應(yīng)相結(jié)合而建立的一種新技術(shù)。酶與抗體或抗原結(jié)合后，既不改變抗體成抗原的免疫學(xué)反應(yīng)的特異性，也不影響酶本身的酶學(xué)活性，即在相應(yīng)而合適的作用底物參與下，使基質(zhì)水解而呈色，或使供氫體由無(wú)色的還原型變?yōu)橛猩难趸汀＿@種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡相電子顯微鏡觀察，也可以用分光光度計(jì)加以測(cè)定。呈色反應(yīng)顯示了酶的存在，從而證明發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng)。所以，這是一種特異而敏感的技術(shù)，可以在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位，或在微克、甚至納克水平上對(duì)其進(jìn)行定量。
