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小鼠雜交瘤細(xì)胞株;XYCDY-BV-E6培養(yǎng)步驟

時間:2024/5/21閱讀:387
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小鼠雜交瘤細(xì)胞株;XYCDY-BV-E6培養(yǎng)步驟:

對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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