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免疫組化實(shí)驗(yàn)應(yīng)該如何分析

時(shí)間:2023/11/22閱讀:811
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 □面密度,累積光密度值(IOD)/待測(cè)區(qū)域組織面積:累積光密度值是所有陽(yáng)性信號(hào)光密度的積分,除以待測(cè)區(qū)域組織面積可反映陽(yáng)性多少和深淺,成正比。優(yōu)點(diǎn)是既考慮了陽(yáng)性的面積以及陽(yáng)性的深淺,且不受待測(cè)組織大小的影響。

□陽(yáng)性率,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)分析陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占總細(xì)胞數(shù)的占比。反映陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量比率高低,成正比。優(yōu)點(diǎn)適用于細(xì)胞類型較單一的情況。比如腫瘤組織中KI67指標(biāo)腫瘤細(xì)胞增值比率,脾臟組織內(nèi)CD3指標(biāo)T細(xì)胞比率等。

□陽(yáng)性細(xì)胞密度,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)/待測(cè)區(qū)域組織面積分析陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占待測(cè)區(qū)域組織面積之比。反映單位面積內(nèi)陽(yáng)性細(xì)胞個(gè)數(shù),成正比。優(yōu)點(diǎn)不受多種細(xì)胞類型數(shù)量影響。常用在浸潤(rùn)型的炎性細(xì)胞中,比如肝組織中某類炎性細(xì)胞占比,代表性指標(biāo)MPO、CD68等。

陽(yáng)性強(qiáng)度,各陽(yáng)性點(diǎn)顏色深淺的平均值:反應(yīng)整張片子或者某個(gè)區(qū)域陽(yáng)性的平均深淺度。明場(chǎng)為平均光密度(average optical density),暗場(chǎng)為平均強(qiáng)度(average intensity),數(shù)值越大陽(yáng)性程度越強(qiáng)。適用性廣,由于沒(méi)有考慮陽(yáng)性面積,在極端情況下會(huì)出現(xiàn),陽(yáng)性極少且顏色深時(shí)陽(yáng)性強(qiáng)度值高,陽(yáng)性點(diǎn)多且顏色淺時(shí)陽(yáng)性強(qiáng)度值低??梢越Y(jié)合陽(yáng)性面積一起評(píng)價(jià)。

□陽(yáng)性面積比,陽(yáng)性面積/待測(cè)區(qū)域組織面積:不考慮陽(yáng)性深淺的變化,單純的比較陽(yáng)性面積占比。

MVD,微血管數(shù)量/視野:?jiǎn)挝幻娣e內(nèi)微血管數(shù)量,對(duì)于微血管的識(shí)別不需具備完整的管腔和紅細(xì)胞,只要有明顯的血管內(nèi)皮細(xì)胞染色、并且能與相鄰的血管、實(shí)質(zhì)細(xì)胞以及間質(zhì)成分相分隔的,就可視為一個(gè)獨(dú)立的血管,分辨不清、管腔直徑>8個(gè)紅細(xì)胞直徑的血管以及具有較厚肌層的血管不納入計(jì)數(shù)內(nèi)。常用指標(biāo)CD31、CD34。此項(xiàng)只能分析高倍視野的圖片。

IRS評(píng)分:對(duì)免疫組化切片中的染色程度(0-3分)以及陽(yáng)性率(0-4分)分別評(píng)分后相乘得到綜合評(píng)分(0-12分)。具體如下,染色強(qiáng)度以目的細(xì)胞呈現(xiàn)染色特性計(jì)分:無(wú)著色為0分,淡黃色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分;以細(xì)胞陽(yáng)性比率進(jìn)行計(jì)分:0~5%為0分,6%~25%為1分,26%~50%為2分,51%~75%為3分,>75%為4分。綜合評(píng)分可劃分陽(yáng)性高低后進(jìn)行統(tǒng)計(jì),常用于癌和癌旁的芯片生存分析中。

H-Score:即 Histochemistry score (組織化學(xué)評(píng)分)的縮寫,是處理免疫組化的一種組織學(xué)評(píng)分方法,將每張切片內(nèi)陽(yáng)性數(shù)量及其染色強(qiáng)度轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的數(shù)值,達(dá)到對(duì)組織染色半定量的目的。H-Score(H-SCORE=∑(pi×i)=(percentage of weak intensity×1)+(percentage of moderate intensity×2)+(percentage of strong intensity×3),式中pi表示陽(yáng)性信號(hào)像素面積/細(xì)胞數(shù)量占比;i代表著色強(qiáng)度)。H-score為0-300之間的數(shù)據(jù),數(shù)據(jù)越大說(shuō)明綜合陽(yáng)性強(qiáng)度越強(qiáng)。


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