紅細胞裂解液-關(guān)于樣本的處理

產(chǎn)品簡介：

本產(chǎn)品是利用細胞內(nèi)外存在鹽離子濃度差而導(dǎo)致細胞膜脹破的原理來裂解無核紅細胞的。本產(chǎn)品經(jīng)無菌處理，主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細胞的分離純化，淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。

紅細胞裂解液（Red Blood Cell Lysis Buffer,或稱 ACK Lysis Buffer）是一種去除紅細胞簡便易行的方法，即用裂解液裂解紅細胞，它既不損傷有核細胞又能充分的去除紅細胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除方法，主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細胞的分離純化，淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。經(jīng)紅細胞裂解液裂解得到的組織細胞中不含紅細胞，可進一步用于原代培養(yǎng)、細胞融合、流式細胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。

使用說明：

1. 1倍體積的新鮮全血，加入3倍體積的紅細胞裂解液。如1ml新鮮全血加入3ml紅細胞裂解液，輕輕渦旋或顛倒混勻。

2. 冰上放置15分鐘，其間輕輕渦旋混勻兩次，紅細胞裂解后，溶液應(yīng)該是清亮透明的。

3. 收集細胞：4℃，450×g離心10分鐘以沉淀白細胞，小心吸棄上清液。

4. 向白細胞沉淀中加入兩倍體積的紅細胞裂解液，輕輕渦旋充分重懸白細胞。如起始血液為1ml，則加入2ml的紅細胞裂解液。

5. 4℃，450×g離心10分鐘沉淀白細胞，小心并*吸去上清液。    6. 重懸細胞，用于后續(xù)實驗；如提取RNA，于此步開始使用DEPC水配制的溶液進行操作。  （組織細胞處理：新鮮組織經(jīng)胰-酶或膠原酶等消化分散成單個細胞懸液，離心棄去上清液，其余同上。）

組織細胞樣品：

1.新鮮組織經(jīng)胰-酶或膠原酶等消化分散成單個細胞懸液，離心棄去上清液；

2.從4℃冰箱中取出ELS裂解液，按1:3-5的比例向細胞沉淀中加入ELS裂解液（1ml細胞壓積加入3-5ml裂解液），輕輕吹打混勻；

3.800-1000rpm離心5-8分鐘，離心棄去上層紅色清液；

4.收集沉淀部分，加入Hank’s液或無血清培養(yǎng)液離心洗2-3次；

5.如裂解不完-全可重復(fù)步驟2和3；

6.重懸細胞，用于后續(xù)實驗；如提取RNA，最好是于步驟4開始使用DEPC水配制的溶液中進行。

注意事項：

本裂解液為無菌產(chǎn)品，分離細胞用于細胞培養(yǎng)時請注意無菌操作。

為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。