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當(dāng)前位置:上海研生生化試劑有限公司>>技術(shù)文章>>中性粒細胞免疫復(fù)合物方法
可采集玻片凝集試驗和試管凝集試驗來檢測凝聚的中性粒細胞,不像紅細胞凝集試驗,粒細胞凝集程序不需加抗球蛋白試劑,僅依賴中性粒細胞自身能量凝聚。采用新生兒自身免疫性中性粒細胞減少癥母親血清進行凝聚試驗,能分析中性粒細胞特異的靶抗原,包括NAl/NA2,NBl/NB2,NCL,NDl,NEt,9a。
幾種檢測抗體的方法可用于檢測抗完整中性粒細胞膜表面抗原的抗體。125L葡萄球菌蛋白和125L抗人IgG能同時檢測中性粒細胞表面的IgG。用熒光素標記的抗*,以間接免疫熒光法也可檢測中性粒細胞抗體。臨床可疑自身免疫性中性粒細胞減少患者的血清中,抗中性粒細胞抗體的陽性率約為35%。陽性患者需做追加試驗,用高速離心法去除免疫復(fù)合物,并且用Fc受體相應(yīng)的單克隆抗體封閉免疫復(fù)合物,再檢測抗中性粒細胞抗體。
抗中性粒細胞抗體也能與正常骨髓髓樣前體細胞反應(yīng),嚴重的中性粒細胞減少癥患者血清易與不成熟的髓樣前體細胞反應(yīng),同時對成熟粒細胞也反應(yīng)。
鑒定特異抗中性粒細胞靶分子技術(shù)包括:蛋白質(zhì)印跡法、免疫沉淀法和抗原捕獲法,抗原捕獲法用單克隆抗體在聚丙乙烯珠或多孔反應(yīng)板內(nèi)固定中性粒細胞膜分子,這些固定的分子經(jīng)血清孵育,抗免疫球蛋試劑檢測特異抗體。
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